إنشاء تكوين خلية كاملة من خلال طريقة Patch Clamp

0 مشاهدات3:12 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ابدأ بشريحة دماغ فأر ثابتة موضوعة في غرفة تسجيل لإعداد الفيزيولوجيا الكهربية مملوءة بسائل دماغي نخاعي اصطناعي للحفاظ على بقاء الخلايا العصبية.

يحتوي الإعداد على ماصة دقيقة مجمعة مسبقا مملوءة بالمحلول الكاتيوني متصلة بمكبر للصوت ووحدة التحكم في الضغط.

تحت المجهر ، حدد موقع الخلية العصبية وضع الماصة الدقيقة بالقرب منها.

استخدم ضغط هواء إيجابي لإزالة أي حطام.

حرك الماصة الدقيقة باتجاه الخلية العصبية حتى تتشكل غمازة على الغشاء ، مما يشير إلى القرب العصبي.

استخدم شفطا ضعيفا لسحب رقعة غشائية صغيرة داخل الماصة الدقيقة.

يؤدي ذلك إلى إحكام إحكام يزيد من مقاومة الماصة الدقيقة ، مما يؤكد إحكام الغلق المستقر.

الحفاظ على إمكانات الخلية في إمكانية الراحة الفسيولوجية لاستقرار الخلية.

بعد ذلك ، قم بتطبيق شفط قصير وقوي لتعطيل غشاء التصحيح ، وإنشاء اتصال مباشر بداخل الخلية.

هذا التكوين للخلية بأكملها جاهز لتسجيل النشاط الكهربائي العصبي.

باستخدام عجلة التركيز البؤري الدقيقة للمجهر، ابدأ التركيز البؤري لأسفل مع خفض الماصة الدقيقة تدريجيا. قم دائما بالتركيز لأسفل أولا، ثم قم بخفض الماصة الدقيقة إلى مستوى التركيز البؤري للتأكد من أن طرف الماصة الدقيقة لا يخترق الشريحة فجأة. عندما تتلامس الماصة الدقيقة مع سطح الشريحة، قم بإبطاء سرعة المعالج الدقيق إلى الوضع المتوسط إلى المنخفض. اضغط برفق على الضغط الإيجابي الخفيف لإزالة أي حطام على المسار.

بعد ذلك ، اقترب من الخلية ، إما بالتناوب مع مقابض التحكم X و Y و Z ، أو عن طريق الاقتراب قطريا حيث يتم تغيير محوري XZ مع دوران مقبض المحور Z. عندما تكون الماصة الدقيقة قريبة بدرجة كافية من الخلية ، ستظهر غمازة على سطح الخلية.

الآن ، قم بتطبيق شفط ضعيف وقصير من خلال الأنبوب المتصل بأنبوب شفط حامل الماصة من أجل إنشاء مانع للتسرب أثناء تكوين gigaseal ، استخدم قائد مكبر الصوت الذي يتم التحكم فيه بواسطة الكمبيوتر لإحضار إمكانات الاحتفاظ بالخلايا إلى إمكانات الراحة الفسيولوجية من أجل منع التغيرات المفاجئة بمجرد تمزق الغشاء. بعد تشكيل gigaseal ، عوض عن السعة السريعة أو البطيئة.

من المهم جدا أن الشفط المطبق ليس قويا جدا ، وإلا فقد يتمزق الغشاء قبل إنشاء الختم.

إذا ظل الختم مستقرا ، وفوق 1 جيجا أوم ، فقم بتطبيق شفط قصير وقوي لتمزيق غشاء البلازما.

يجب أن يكون الشفط قصيرا ، وأقوى من الضغط المطبق عند إنشاء مانع للتسرب من أجل تمزيق الغشاء بشكل صحيح وتحقيق تكوين مستقر للخلية الكاملة.

12:00

التصحيح تسجيلات المشبك على سليمة الظهرية جذر العقد من الجرذان الكبار

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:30

إعداد واستخدام خلايا العضلات الملساء الإنسان معزولة حديثا لتوصيف 9-فينانترول الحساسة التيارات التيشن

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:52

إنشاء منصة فيزيولوجية كهربية لنمذجة ALS مع الخلايا النجمية والخلايا العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات الخاصة بالمنطقة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:42

الفيزيولوجيا الكهربية لمشبك التصحيح للخلية الكاملة: طريقة لدراسة الخصائص الكهربائية للخلايا العصبية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

02:42

إنشاء تكوين مشبك جهد خلية كاملة للتسجيلات الفيزيولوجية الكهربية في شرائح الدماغ

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:34

إنشاء مشبك رقعة كامل الخلية للتسجيل الفيزيولوجي الكهربي من الخلايا العصبية الحسية Vomeronasal

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:58

كله المشبك التصحيح الخلايا لدراسة آليات التحفيز العصبية الأشعة تحت الحمراء

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:01

A-متعدد القطب نظام التصحيح، المشبك بمساعدة الحاسوب

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

13:07

قناة واحدة الخلية المرفقة تسجيل التصحيح، المشبك

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:23

تسجيلات خلية كاملة التصحيح، المشبك في الدماغ شرائح

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 1 أغسطس 2026