موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:40 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بثقافة الخلايا العصبية العقدية الحلزونية على مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية ، أو MEA.
يتكون MEA من تسجيل أقطاب كهربائية متصلة بجهات الاتصال عبر دائرة.
اغسل MEA لإزالة الوسائط وتجفيف جهات الاتصال لتجنب الضوضاء الناجمة عن الرطوبة أثناء التسجيل.
قم بتركيب MEA على حامله وقم بتثبيته في إعداد التسجيل.
تتماشى جهات اتصال MEA مع موصلات الحامل التي تنقل الإشارات الكهربائية إلى إعداد التسجيل.
أضف حلا لمحاكاة البيئة خارج الخلية ، مما يسمح بالنشاط الفسيولوجي الطبيعي في الخلايا العصبية.
ابدأ التسجيل. تكتشف الأقطاب الكهربائية الإشارات التلقائية أو إمكانات الفعل الناتجة عن الخلايا العصبية ، والتي يتم تصورها على شكل طفرات على واجهة البرنامج.
الآن ، قم بتطبيق نبضة كهربائية على قطب كهربائي واحد يظهر نشاطا تلقائيا.
يولد النبض مجالا كهربائيا ، مما يحفز الخلايا العصبية على الأقطاب الكهربائية المجاورة.
سجل النشاط المعتمد على التحفيز.
أخيرا ، أضف السم العصبي الذي يمنع القنوات الأيونية ذات الجهد الكهربائي ، مما يمنع توليد جهد الفعل.
سجل الإشارة لتحديد ضوضاء الخلفية.
بعد 18 يوما من الثقافة الجماعية ، اغسل مزرعة MEA بالمحلول خارج الخلية الذي تم تحضيره مسبقا في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، جفف جهات الاتصال الخاصة بشريحة MEA بقطعة من الأنسجة ، وقم بتركيب MEAs على حامل MEA. أخيرا ، قم بتثبيت MEA على إعداد التسجيل.
بعد ذلك ، أضف 300 ميكرولتر من المحلول خارج الخلية ، وانتظر لمدة 10 دقائق للسماح للنظام بالاستقرار قبل التسجيل. الآن ، سجل النشاط التلقائي لمدة دقيقتين من جميع الأقطاب الكهربائية ، وحدد الأقطاب الكهربائية النشطة. بعد ذلك ، حدد الأقطاب الكهربائية التي تستجيب للتحفيز.
لاستبعاد قطعة أثرية التحفيز ، قم بالتحفيز من نفس القطب 10 مرات. إذا استجابت المزرعة ثماني مرات على الأقل من أصل 10 مرات ، فيمكن افتراضها كاستجابة إيجابية عند التحفيز الناجم عن القطب. لتحديد ضوضاء الخلفية ، قم بتطبيق TTX على المزرعة بتركيز ميكرومولار واحد لمنع قنوات الصوديوم ذات الجهد الكهربائي ، ثم قم بالتسجيل لمدة دقيقتين.