موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:44 دقيقة • July 8th, 2025
خذ ماصة تحفيزية تحتوي على فلوروفورات حمراء غير حساسة للكالسيوم في السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي أو ACSF.
ضع الماصة بالقرب من الخلية العصبية المستهدفة في شريحة الحصين.
ضع ماصة رقعة مع قطب تسجيل مغمور في إلكتروليت يحتوي على فلوروفورات حمراء غير حساسة للكالسيوم ومؤشر الكالسيوم الأخضر بالقرب من الهدف.
استخدم ضغطا إيجابيا ثابتا لإزعاج سطح الأنسجة لفترة وجيزة ، مما يشير إلى القرب من الهدف.
عندما تتشكل الغمازة على الغشاء العصبي ، حرر الضغط لتشكيل ختم.
اضغط سلبيا لتشديد الختم.
تثبيت إمكانات الغشاء عند جهد سالب ثابت.
استمر في الضغط السلبي لكسر الغشاء ، مما يسمح للإلكتروليتات المحتوية على الفلوروفور بالانتشار داخل الخلايا العصبية.
تصور التألق الأحمر للعمود الفقري المتغصني المستهدف وقم بمحاذاة ماصة التحفيز بالقرب منه.
ضع نبضات كهربائية لفتح قنوات الكالسيوم.
استخدم الفحص المجهري ثنائي الفوتون لتصور التغيرات العابرة في مستويات الكالسيوم كما هو موضح في التألق الأخضر.
في هذه الخطوة ، انقل شريحة الحصين إلى حمام بهدف مجهر ثنائي الفوتون بالمسح بالليزر. قم ببث الحمام باستمرار باستخدام ACSF المؤكسج العادي. بعد ذلك ، استخدم الفحص المجهري لتباين التداخل التفاضلي بالأشعة تحت الحمراء لتحديد موقع الخلية ذات الأهمية باستخدام حجمها وشكلها وموضعها.
بعد ذلك، املأ ماصة محفزة بمحلول عادي ACSF يحتوي على الفلور
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية