موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:28 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بنظام حقن يحتوي على قطب كهربائي. يتميز هذا بإبرة دقيقة وقطب كهربائي من الأسلاك الفضية يتم إدخاله داخل ماصة زجاجية دقيقة.
املأ الحقن بمحلول دواء اختبار يحتوي على صبغة لتسهيل تتبع انتشار الدواء داخل الدماغ.
نعلق حقنة مملوءة بالزيت المعدني بالحقن. امسح أي سائل زائد.
قم بتأمين هذا الحقن على وحدة تجسيمية وقم بتوصيله بنظام مضخة دقيقة.
ضع الحقن على منطقة الدماغ المستهدفة لفأر مخدر مع وجود ثقب جراحي في الجمجمة.
قم بخفض الحقن تدريجيا لاختراق المنطقة المستهدفة.
أوقف الإدخال عند تلقي إشارات كهربائية محددة تؤكد التنسيب الأمثل للحقن.
قم بتغطية الجمجمة المكشوفة بأجار دافئ لمنع جفاف الأنسجة.
اسمح لأنسجة المخ بالاستقرار.
حقن الجرعة المطلوبة من الدواء.
سجل الإشارات الكهربائية لمراقبة نشاط الخلايا العصبية استجابة للدواء المعطا.
قم بإعداد الحقن عن طريق ملء حقنة من 5 إلى 10 ميكرولتر بالزيت المعدني. بعد ذلك ، قم بإعداد الدواء المعني بصبغة في محلول ملحي فسيولوجي. هنا ، يتم خلط 0.5٪ شيكاغو سكاي بلو مع 300 ميكرومولار GABA. الآن ، املأ ماصة الحقن عن طريق تحميل حقنة سعة 1 ملليلتر بالمحلول المحضر أولا ، ثم استخدام المحقنة لتحميل الماصة.
عند إزالة المحقنة ، حافظ على الضغط الخفيف على المكبس حتى لا يزيل الفراغ المحلول من الحقن. تحقق من تسرب السوائل عند نقاط التسرب المحتملة. امسح أي سوائل زائدة وأعد التحقق من عدم وجود تسرب. الآن نعلق حقنة صغيرة مع زيت معدني إلى الحقن. ثم امسح أي محلول زائد بالشاش.
تحقق من طرف الحقن. يجب أن يكون من الممكن تدفق قطرات صغيرة من المحلول من خلاله. خلاف ذلك ، يتم حظره أو تسريبه. الآن ، قم بتركيب الحقن بإحكام على نظام المضخة الدقيقة. بعد ذلك ، حرك موضع الحقن إلى إحداثيات الهدف ، وقم بخفض القطب الكهربائي إلى القولون العلوي ، والذي يمكن تحديده من خلال تسجيل الإمكانات المستحثة بصريا.
أثناء خفض القطب ، قم بتطبيق ضغط إيجابي صغير عن طريق تطبيق معدل منخفض من الحقن لتجنب الانسداد. مقاطعة الحقن عند الوصول إلى الهيكل. بعد إدخال الحقن ، قم بتغطية القشرة المكشوفة بأجار دافئ لمنع الجفاف. بعد التثبيت النهائي للقطب ، انتظر 30 دقيقة للسماح بتثبيت الأنسجة المحيطة بالقطب. ثم قم بحقن 400 إلى 800 نانولتر من المحلول بمعدل 40 نانولتر في الدقيقة حتى تعطيل النشاط العصبي في القولون العلوي.
يجب أن يظهر القطب انخفاضا في المسامير أثناء حقن المحلول المثبط.