موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:26 دقيقة • July 8th, 2025
خذ غطاء منقوشا مع ثقافة حلقة عصبية داخل لوحة مزرعة تحتوي على محلول تسجيل خارج الخلية.
يتم تحضين هذه الخلايا مسبقا بصبغة فلورية حساسة للكالسيوم لقياس مستويات الكالسيوم داخل الخلايا.
ضع اللوحة على مرحلة المجهر الفلوري.
ضع الملف المغناطيسي الدائري المتصل بمحفز مغناطيسي بشكل مركزي على مسافة مناسبة فوق المزرعة لضمان التحفيز الأمثل.
باستخدام المحفز المغناطيسي ، قم بتطبيق الجهد العالي والتيار عبر الملف لتوليد مجال مغناطيسي متغير بمرور الوقت.
يحفز هذا المجال المغناطيسي مجالا كهربائيا في الخلايا العصبية ، مما يولد جهد فعل.
عند الوصول إلى الطرف العصبي ، ينشط جهد الفعل قنوات الكالسيوم ذات الجهد الكهربائي ، مما يسمح بتدفق الكالسيوم إلى الخلية وإطلاق الناقل العصبي في المشبك العصبي.
يسهل هذا الإصدار نقل الإشارة إلى الخلايا العصبية المجاورة من خلال الاتصالات المتشابكة.
بسبب تدفق أيونات الكالسيوم ، ترتبط هذه الأيونات بالصبغة الحساسة للكالسيوم داخل الخلايا ، مما يزيد من التألق الذي يدل على النشاط العصبي.
لبدء التحفيز المغناطيسي ، ضع ثقافة عصبية ، نمت في نمط دائري الشكل ، تحت المجهر. تحفيز الثقافة باستخدام ملف تحفيز مغناطيسي دائري قياسي ومحفز داعم ، وهما متاحان تجاريا.
لتحفيز الثقافات ذات شدة المجال المغناطيسي غير القياسية ، قم بتوصيل ملف تحفيز مغناطيسي مخصص بالمحفز المصمم خصيصا. بعد ذلك ، بمساعدة مؤشر الليزر ، قم بمحاذاة مركز الثقافة مع مركز الملف لضمان التحفيز الناجح.
اضبط موضع الملف بحيث يظل حوالي خمسة ملليمترات فوق مركز الثقافة. بمجرد وضع ملف التحفيز بشكل صحيح ، قم بتحميل المحفز بجهد يصل إلى خمسة كيلو فولت. بعد ذلك ، باستخدام مفتاح عالي التيار والجهد العالي ، قم بتفريغ الجهد العالي والتيار من خلال ملف التحفيز لتوليد نبضة مغناطيسية تحفز نشاط الخلايا العصبية المستنبتة.