دراسة استثارة الخلايا العصبية الفلورية باستخدام مشبك التصحيح للخلية الكاملة

0 مشاهدات3:06 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ شريحة إكليلية من الفأر في غرفة تسجيل مليئة ب aCSF.

تحتوي الشريحة على مجموعة عصبية هرمية متفرقة تعبر عن إنزيم مستهدف وبروتين فلوري.

قم بتجميع ماصة تسجيل تشتمل على محلول داخل الخلايا وقطب كهربائي متصل بمكبر صوت لقياس الإشارات العصبية.

تحديد منطقة الأنسجة المستهدفة مجهريا وتحديد موقع الخلايا العصبية الفلورية.

اضغط إيجابيا على الماصة لمنع الانسداد ودفعها إلى الخلية العصبية المستهدفة.

يتسبب الضغط الإيجابي في حدوث فجوة طفيفة على الغشاء العصبي عند ملامسته.

حرر الضغط ، وتشكيل ختم محكم بين الغشاء والطرف.

اضبط إمكانات الاحتفاظ بقيمة سالبة ثابتة لتثبيت الخلايا العصبية.

استخدم ضغطا سلبيا قصيرا لتمزق الغشاء ، وتوصيل السيتوبلازم بداخل الماصة وإنشاء تكوين خلية كاملة.

قم بالتبديل إلى وضع المشبك الحالي وقم بتطبيق نبضات التيار الإيجابي ، مما يولد إمكانات عمل تدل على استثارة الخلايا العصبية.

انقل شريحة إلى غرفة التسجيل باستخدام ماصة باستور أو فرشاة صغيرة. أمسك الشريحة باستمرار بالقيثارة ، وقم بتكليفها باستخدام ACSF بمعدل 2 مل في الدقيقة. لتصحيح خلية عصبية إيجابية GFP ، حدد موقع منطقة الاهتمام من خلال المجهر عند 10x. بعد ذلك ، ابحث عن خلية إيجابية GFP باستخدام هدف 60x.

بعد ذلك ، املأ قطب التسجيل بمحلول داخل الخلايا. بعد ذلك، ضع ماصة زجاجية في حامل الماصة. بعد ذلك ، ضع طرف الماصة في الحمام وركز على الحافة. بمجرد أن تكون الماصة في الحمام، قم بالضغط الإيجابي من خلال نظام التحكم في الضغط الخلفي.

اقترب من الخلية ذات الأهمية تحت التوجيه البصري مع الحفاظ على الضغط الخلفي في الماصة. عند ظهور غمازة صغيرة على سطح الخلية ، حرر الضغط. في هذه المرحلة ، قد يتم تشكيل ختم محكم بمقاومة أكبر من 1 جيجا أوم. خلاف ذلك ، قم بتطبيق ضغط سلبي خفيف لتسهيل ذلك.

أثناء تشكيل الختم ، اجعل مشبك الجهد الثابت إلى سالب 60 مللي فولت. بمجرد تشكيل ختم الجيجاأوم ، قم بتطبيق نبضة شفط لتمزيق غشاء الخلية واقتحام وضع الخلية بأكملها. بمجرد أن يكون في وضع الخلية الكاملة ، قم بالتبديل من مشبك الجهد إلى وضع المشبك الحالي وابدأ التسجيل.

07:23

تسجيلات خلية كاملة التصحيح، المشبك في الدماغ شرائح

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:39

كامل خلية التصحيح المشبك تسجيلات لتحديد الكهربية من أيون الانتقائية في تشانلرودوبسينز

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:52

تقييم متشابك تعدد استخدام المشبك تصحيح كامل الخلية الكهربية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:42

الفيزيولوجيا الكهربية لمشبك التصحيح للخلية الكاملة: طريقة لدراسة الخصائص الكهربائية للخلايا العصبية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:12

إنشاء تكوين خلية كاملة من خلال طريقة Patch Clamp

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:05

التحفيز الضوئي وتسجيلات مشبك التصحيح للخلية الكاملة للخلايا العصبية في شرائح الحصين الفأر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:45

تسجيل مشبك رقعة الخلية الكاملة في خلية عصبية جيلاتينية جوهرية لشريحة من الحبل الشوكي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:58

كله المشبك التصحيح الخلايا لدراسة آليات التحفيز العصبية الأشعة تحت الحمراء

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:34

تحديد مجموعات الخلايا العصبية الحسية المحددة لدراسة القنوات الأيونية المعبر عنها

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:44

التصحيح المشبك تسجيل من خلايا النجمي عديم الاستطالات في جبل شقة إعداد Deafferentated شبكية العين الفأر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 1 أغسطس 2026