التسجيل البصري للنشاط العصبي في شرائح الدماغ الملطخة بصبغة حساسة للجهد

خذ شريحة دماغ فأر ثابتة ملطخة بصبغة حساسة للجهد أو VSD ، جزيئات الفلورسنت التي تندمج في الغشاء العصبي وتستجيب للتغيرات المحتملة في الغشاء.

ضع الشريحة في غرفة التسجيل.

قم بتركيب القطب الأرضي للحصول على مرجع جهد أساسي.

بعد ذلك ، ضع أقطاب التحفيز والتسجيل على الشريحة.

تطبيق نبضة كهربائية.

يحفز النبض الخلايا العصبية ، مما يؤدي إلى فتح قناة الصوديوم ذات الجهد الكهربائي وتدفق أيونات الصوديوم ، مما يؤدي إلى تغيير محتمل الغشاء.

يؤدي هذا إلى جهد فعل ، يقاس بواسطة قطب التسجيل ، ويغير خصائص الفلورسنت ل VSD.

قم بتعريض شريحة الدماغ لطول موجي معين لإثارة VSD وتحفيز انبعاث التألق.

بعد التحفيز ، تغلق قنوات الصوديوم بينما تفتح قنوات البوتاسيوم ذات الجهد الكهربائي ، مما يعزز تدفق أيونات البوتاسيوم.

هذا يغير إمكانات الغشاء مرة أخرى وبالتالي يغير مضان VSD.

سجل التألق في الوقت الفعلي لتمثيل النشاط العصبي بصريا.

لبدء هذا الإجراء ، قم بتشغيل مكبر الصوت والكمبيوتر ونظام الكاميرا وافتح البرنامج. صب aCSF في أنبوب سعة 50 مل ، وقم بفقاعاته بالكربوجين. استخدم مضخة تمعجية لتدوير aCSF ، واضبط معدل التدفق على ما يقرب من مليلتر واحد في الدقيقة.

بعد ذلك، اضبط ارتفاع ماصة الشفط بحيث يكون مستوى السائل داخل غرفة التجربة ثابتا دائما. ضع القطب الأرضي في الغرفة. بعد ذلك ، املأ القطب الزجاجي بكمية صغيرة من aCSF ، وضعه في