موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 6:22 دقيقة • July 8th, 2025
خذ الرأس المقطوع لفأر معدل وراثيا. تحتوي الظهارة الشمية في أنفها على الخلايا العصبية الحسية الشمية ، أو OSNs ، مع مستقبلات رائحة تحمل علامات الفلوروفور.
قم بإزالة الجلد وتشريح الرأس لعزل الحاجز مع الظهارة الشمية المرفقة.
افصل الظهارة وقم بتثبيتها في غرفة التسجيل.
باستخدام المجهر الفلوري ، اكتشف المستقبلات المصنفة لاستهداف مقبض OSNs المتغصن.
أحضر ماصة تسجيل بمحلول داخل الخلايا يحتوي على النيستاتين، وهو مضاد حيوي مثقب للغشاء.
استخدم ضغطا إيجابيا لتجنب انسداد الماصة. أدخل الماصة في الظهارة واقترب من OSN.
قم بالتبديل إلى الضغط السلبي ، وتشكيل ختم بغشاء الخلية. تطبيق التيار للحفاظ على الغشاء في إمكانات الراحة.
يثقب النيستاتين الغشاء ، مما يسمح بقياس التيارات الأيونية داخل الخلايا.
ضع ماصة تحتوي على منشط للرائحة بالقرب من OSN. حرر المنشط ، الذي يرتبط بمستقبلات الرائحة ، مما يؤدي إلى فتح القناة الأيونية للسماح بتدفق الأيونات. سجل الإشارات الفيزيولوجية الكهربية الناتجة.
بالنسبة لهذا البروتوكول ، اجعل الفئران متاحة بين 2 و 4 أسابيع. في هذا العرض التقديمي ، يتم استخدام الفئران التي تعبر عن OR / IRES / tauGFP.
باستخدام فئران OR / IRES / tauGFP ، سيتم تصنيف جميع الخلايا العصبية التي تعبر عن OR محل الاهتمام ب GFP. يمكن استخدام هذه الطريقة للأو معبرا عنها في جميع المناطق. ومع ذلك ، سيكون التشريح
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية