المراقبة البصرية والفيزيولوجية الكهربية المتزامنة للخلايا العصبية في شرائح الدماغ

ابدأ بزرع السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي أو aCSF فوق شبكة شبكية في غرفة التروية.

انقل شريحة دماغية تحتوي على خلايا عصبية تعبر عن البروتين الفلوري وقم بتثبيتها بجهاز سلكي بالبلاتين.

قم بتدوير الشبكة للمحاذاة.

اخفض المسبار متعدد القنوات باتجاه الشريحة.

اضبط مكعب المرشح لتصور بروتين الفلورسنت.

قم بتدوير الشريحة لمحاذاة المسبار.

اضبط ارتفاع المسبار تحت سطح الأنسجة.

الآن ، قم بدمج aCSF والتركيز على الخلايا العصبية المسماة بالفلورسنت.

باستخدام هدف عالي الطاقة ، ركز على الأنسجة واضبط ضوء الإثارة.

استخدم مرشح ضوئي مناسبا لمراقبة التألق في الخلايا العصبية.

اضبط العدسة الموضوعية لتوفير مساحة لماصة التصحيح والضغط الإيجابي.

بعد ذلك ، ضع الماصة بالقرب من الخلية العصبية لتشكيل غشاء.

أخيرا ، قم بتطبيق شفط ضعيف لإنشاء ختم غشائي ، متبوعا بشفط قوي لكسر الغشاء والحصول على تسجيلات كهربائية من الخلايا العصبية المستهدفة.

لوضع المسبار متعدد القنوات في شريحة أنسجة المخ خارج الجسم الحي ، قم بنشر ACSF التجريبي بمعدل ثلاثة إلى ستة ملليلتر في الدقيقة ، وانقل شريحة الدماغ التي تحتوي على منطقة الاهتمام إلى الشبكة الشبكية في غرفة التروية المجهرية. قم بتثبيت شريحة الدماغ بقيثارة بلاتينية. قم بتدوير شبكة الشبكة بحيث يكون خط ملامسات القطب الكهربائي على الطرف البعيد للمسبار متعدد القنوات عموديا تقريبا على سطح PL.