موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:18 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بتشريح صيوان الفأر ، أو الأذن الخارجية ، مع تعرض أعصابها المتصلة.
أدخل العصب المخصص للتسجيل في قطب التسجيل.
قم بإزالة الطبقة الدهنية بالقرب من هامش الصيوان لكشف قاعدة بصيلات الشعر ، ثم قم بطي الجلد لكشف الشعر للتحفيز.
ضع مسبار التحفيز الميكانيكي للمس الشعر وتحويله.
ينشط هذا التحفيز النهايات العصبية الحسية ، ويفتح القنوات الأيونية ذات البوابات الميكانيكية ، ويسمح بتدفق الأيونات الإيجابي ، ويولد إمكانات الفعل.
تنتشر إمكانات الفعل من خلال هذه النهايات إلى العصب الذي يتم تسجيله. تصور الإشارة.
بعد ذلك ، أضيفي صبغة الفلورسنت واستمري في تحفيز الشعر.
ترتبط الصبغة بالأغشية العصبية المحفزة ويتم استيعابها عن طريق الالتقام الخلوي دون التأثير على نشاط الخلايا العصبية.
بعد التحفيز ، اغسل لإزالة الصبغة غير المقيدة.
أضف عامل عزل لإزالة الصبغة غير الداخلية المرتبطة بالغشاء.
باستخدام الفحص المجهري الفلوري ، تصور التلوين في بصيلات الشعر لتحديد النهايات العصبية المحفزة ميكانيكيا.
لعمل تسجيلات خاضعة للرقابة لإمكانات الفعل التي يثيرها التحفيز ، استخدم مسبارا ميكانيكيا من زجاج القطب الكهربي الصغير البورسليكات المصقول بالنار 10 سم المتصل بمشغل كهرضغطية من السيراميك. ضع المسبار بحيث يتحرك بالتوازي مع طية الجلد ويلامس الشعر وليس الجلد. ضعه على ارتفاع نصف إلى ملليمتر واحد فوق سطح الجلد. بعد ذلك ، تحقق يدويا من التحفيز عن طريق الاستماع إلى إخراج الصوت عندما يتحرك المسبار.
الآن ، قم بإعداد البرنامج لدفع التحفيز الميكانيكي لمنطقة صغيرة من الشعر. على سبيل المثال ، قم ببرمجة التحفيز لمدة ثلاث ثوان بخمسة جيوب هيرتز كل 10 ثوان. هذا يتطلب إزاحة مسبار بين 200 و 2000 ميكرون. بعد ذلك ، تابع استخدام التحفيز الآلي المتكرر للتحقق من اتساق الاستجابات المسجلة في الأعصاب. يجب أن تكون النتائج القابلة للتكرار قابلة للتحقيق.
عندما تكون النتائج متسقة ، قم بإسقاط معدل التكرار إلى كل 30 ثانية. يتم توفير مزيد من التعليمات في بروتوكول النص. للتحقق من خصائص القنوات الحسية الميكانيكية وتسمية الأطراف الحسية الميكانيكية حول بصيلات الشعر ، أضف 10 ميكرومولار FM143 إلى المحلول واتركه لمدة 60 دقيقة ، مع الاستمرار في تحفيز الشعر باستخدام المسبار المتذبذب.
تمنع هذه الصبغة قنوات محول الطاقة المرشحة في الخلايا العصبية الحسية في الثقافة وفي خلايا شعر القوقعة. ومع ذلك ، فإنه لا يمنع إطلاق النار في الوافدات بصيلات الشعر الناضجة في الموقع. يظهر وضع العلامات على النهايات أن الصبغة تعمل كأطراف ، والتي تستمر في الاستجابة للتحفيز الميكانيكي طوال فترة التعرض للصبغة.