تسجيل إمكانات المجال المحلي من نصفي الكرة المخية لدماغ الفأر

ابدأ بفأر مخدر ورأسه مؤمن في إطار تجسيمي.

حلق وتعقيم فروة الرأس.

قم بعمل شق وإزالة الأنسجة المتبقية لكشف الجمجمة.

نظف الجمجمة بمطهر وحفر ثقوبا في المواقع المستهدفة.

قم بإزالة الطبقة الخارجية من الدماغ.

أدخل أقطاب كهربائية دقيقة مملوءة بمحلول أيوني في الثقوب بالزاوية المرغوبة.

اخفض كلا القطبين الدقيقين في الإحداثيات المستهدفة للدماغ.

اختبر مقاومة الأقطاب الكهربائية واضبط إعدادات التسجيل لضمان الاستحواذ الموثوق به على إمكانات المجال المحلي أو بيانات LFP.

يعكس LFP تغيرات الجهد الناتجة عن النشاط الجماعي للعديد من الخلايا العصبية داخل منطقة صغيرة.

سجل LFPs من نصفي الكرة الأرضية لمقارنة النشاط العصبي بينهما.

قبل الجراحة ، تأكد من عمق تخدير الفأر عن طريق إجراء قرصة الذيل أو إصبع القدم بالملقط. بعد ذلك ، ضع الماوس في جهاز تجسيمي ، وقم بإصلاح رأسه. ضع مرهما على كلتا العينين للحفاظ على رطوبتهما.

ثم احلق الرأس وقم بتعقيم المنطقة. قم بعمل شق صغير من 12 إلى 15 ملم في منتصف المنطقة المحلوقة. باستخدام الملقط ، اسحب فروة الرأس برفق بعيدا عن خط الوسط. بعد ذلك ، افصل الجلد برفق ، وقم بإزالة الأنسجة المتبقية.

نظف الجمجمة باستخدام براعم قطنية مطلية ببيروكسيد الهيدروجين. تحت المجهر المجسم ، قم بحفر فتحتين صغيرتين من نصف قطر 1 إلى 1.5 ملم على كلا الجانبين الأيسر والأيمن من الجمجمة للسماح بإدخال الأقطاب الكهربائية الدقيقة للتسجيل في مناطق M2.

بعناية ، قم بإزالة الأم الجافية بإبرة التنغستن ، ثم أدخل قطبين صغيرين منفصلين مملوءين بكلوريد الصوديوم 0.5 مولار في الثقوب بزاوية 60 درجة باستخدام معالجات دقيقة ميكانيكية.

لتسجيل LFP ، قم بخفض الأقطاب الزجاجية اليمنى واليسرى ببطء إلى إحداثيات M2. لمراقبة الجودة ، اختبر مقاومة كل قطب كهربائي باستخدام مكبر الصوت التفاضلي. بعد ذلك ، اضبط عملية التسجيل على 0.1 هرتز تمريرة عالية و 1,000 هرتز تمريرة منخفضة مع تضخيم 1,000 مرة. اجمع بيانات LFP الأولية الرقمية في حالة مستقرة لمدة 60 ثانية على الأقل ، مع تنفس الفأر بالتساوي بنفسين في الثانية تحت التخدير.