تسجيل نشاط العصب الوارد المساريقي في مقطع الصائم الفأر خارج الجسم الحي

ابدأ بغرفة تسجيل تحتوي على جزء مقطوع من صائم الفأر ، وهو جزء من الأمعاء الدقيقة ، مغمور في محلول إلكتروليت ومثبت بدبوس.

يشتمل الجزء الصائمي على الأنسجة الدهنية المحيطة بعصب مساريقي وارد تم تشريحه مسبقا ، والذي ينقل الإشارات من الصائم إلى الدماغ.

يتم توصيل الجزء بمنافذ التدفق والتدفق الخارج للغرفة لتدفق المحلول.

خذ قطب شفط متصلا بمعالج دقيق ووحدة تسجيل.

املأ قطب الشفط بمحلول المنحل بالكهرباء وضعه بالقرب من العصب الوارد المساريقي.

ضع شفطا لطيفا لسحب العصب بالأنسجة الدهنية المحيطة لتشكيل ختم محكم.

أغلق منفذ التدفق مع الحفاظ على التدفق الداخلي لزيادة الضغط الداخلي والانتفاخ تدريجيا للجزء الصائمي.

يؤدي هذا إلى إثارة العصب الوارد المساريقي حول الصائم ، مما يولد إشارة كهربائية.

سجل نشاط العصب الوارد استجابة لتغيرات الضغط الصائمي.

في هذا الإجراء ، باستخدام معالج دقيق ، قم بخفض طرف قطب الشفط في حمام الأعضاء. بعد ذلك ، قم بشفط بعض محلول كريبس برفق من حمام الأعضاء بحيث يتم غمر طرف القطب في محلول كريبس. تأكد من أن محلول كريبس يغطي قطب السلك داخل قطب الشفط.

بعد ذلك ، ضع طرف قطب الشفط مباشرة بجوار خيط العصب الوارد المتقاطع ، وارسم الخيط العصبي المتقاطع في الشعيرات الدموية على طولها بالكامل. قم بمناورة طرف القطب الكهربائي باتجاه الأنسجة الدهنية ، واستنشقها في الشعيرات الدموية الزجاجية باستخدام المكبس ، وبالتالي إغلاق العصب الموجود في الشعيرات الدموية ميكانيكيا من محتويات حمام الأعضاء.

للتحقق من تسجيل نشاط العصب الوارد ، قم بإجراء زيادة ناتجة عن الانتفاخ المنحدر في إطلاق النار الوارد عن طريق إغلاق منفذ الإخراج ليؤدي إلى ارتفاع تدريجي في الضغط في الجزء المعوي. قم بتنفيذ البروتوكول التجريبي المطلوب فقط عندما ينتج عن ثلاثة انتفاخات منحدرة متتالية تفريغ متعدد الوحدات قابل للتكرار.