مراقبة قشرة الدماغ باستخدام مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية استجابة للعوامل المسببة للنوبات

ابدأ بشريحة دماغية تحتوي على القشرة الحزامية الأمامية ، أو ACC ، ومناطق المهاد.

باستخدام مرساة ، قم بتأمين شريحة الدماغ في مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية أو غرفة MEA ، وهو جهاز قياس إشارة كهربائي مليء بالسائل الدماغي النخاعي الاصطناعي المؤكسج.

ضع أقطاب تحفيز التيار المباشر عبر الجمجمة أو tDCS مع وضع أحدهما بالقرب من ACC والآخر بعيدا عن ACC لتوصيل التيار المباشر إلى شريحة الدماغ.

سجل إشارات خط الأساس وتوصيل التيار الكهربائي إلى الشريحة من خلال tDCS.

اضبط طول القطب وتيار tDCS للحصول على إشارات الجودة.

باستخدام قطب كهربائي محفز ، قم بتوصيل نبضات من التيار إلى المهاد ، مما يؤدي إلى نوبة اصطناعية عن طريق تحفيز ACC.

اضبط التيار لتحفيز مسار المهاد الحزامي ، الذي يربط المهاد ب ACC ، للحصول على استجابة ACC المثلى.

سجلها من خلال منطقة الشرق الأوسط وأفريقيا.

ضخ الأدوية المحفزة للنوبات في غرفة MEA

باستخدام الأقطاب الكهربائية المحفزة ، قم بتوصيل نبضات كهربائية إلى مسار المهاد الحزامي وتسجيل استجابة ACC التي يسببها الدواء.

تأكد من وضع مسبار MEA على النظام متعدد القنوات. استخدم أنبوبا واحدا لتوجيه ACSF إلى غرفة MEA والأنبوب الآخر لتوجيه ACSF خارج الغرفة. قم ببث المستحضر باستمرار باستخدام ACSF الدافئ المؤكسج عند 30 درجة مئوية. باستخدام قطعة قطن مبللة ، انقل شريحة من الدماغ إلى منطقة الشرق الأوسط وأفريقيا.

حرك شريحة الدماغ بعناية لتوجيه ACC فوق الأقطاب الكهربائية. بعد ذلك ، قم بتثبيت شريحة الدماغ باستخدام مرساة شريحة لضمان اتصال كهربائي جيد بين الشريحة والأقطاب الكهربائية. بعد ذلك ، ضع قطب الأنود القريب من ACC وقطب الكاثود البعيد عن ACC. سجل شدة المجال من خلال اتجاهي المجال ل MEA. ثم قم بتوصيل التيارات الكهربائية باستخدام محفز.

اضبط المسافة بين قطبي كلوريد الفضة إلى حوالي 1.5 إلى 2 سم ، واضبط القوة الحالية للمحفز لجعل DCS بين 0.5 و 2 مللي أمبير. في هذا الإجراء ، ضع قطب التنغستن في MT ، وقم بتوصيل النبضات من المحفز إلى منطقة المهاد للشريحة. بعد ذلك ، استخدم شدة التيار المختلفة لتحديد العتبة التي تثير استجابة ACC.

حرك قطب التنغستن على طول مسار المهاد الحزامي للحصول على ملف الاستجابة الأمثل. سجل من 10 إلى 20 استجابة ACC ، واستخدم البرنامج لحساب متوسط جميع استجابات ACC الناتجة عن التحفيز الفارغ تلقائيا.

للحث على نشاط يشبه النوبات ، أضف 250 ميكرومولار ل AP و 5 ميكرومولار بيكوكولين إلى محلول التروية ، واستمر في نشر الشريحة لمدة 2 إلى 3 ساعات. حافظ على المضخة بمعدل تروية سريع نسبيا ، مما قد يساعد في منع تراكم تدرج الأس الهيدروجيني. بعد ذلك ، ضع قطب التنغستن في MT ، وقم بتقديم التحفيز الكهربائي للحصول على ملف تعريف استجابة ACC. سجل من 10 إلى 20 عملية مسح ومتوسط الردود. بعد ذلك ، استبدل محلول التروية ب ACSF الطازج لغسل الأدوية.