موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:06 دقيقة • July 8th, 2025
قم بتأمين ذبابة الفاكهة ذات العيون البيضاء إلى حامل في ساحة التسجيل.
ضع مصدر ضوء بالقرب من الذبابة.
زرع القطب الأرضي في ظهر الذبابة.
أدخل قطب التسجيل في المحيط الخارجي لعين الذبابة ، بالقرب من خلايا المستقبلات الضوئية لشبكية العين التي تحتوي على صبغة ضوئية.
الظلام التكيف مع الذبابة لفترة وجيزة. هذا يحول metarhodopsin ، الشكل الذي يتم تنشيطه بالضوء من الصبغة الضوئية ، إلى رودوبسين ، شكله غير النشط.
ضع نبضة ضوء برتقالية عالية الكثافة. هذا يحول أي ميتارودوبسين متبقي إلى رودوبسين.
بعد ذلك ، قم بتطبيق نبضات الضوء الأزرق. يحول الضوء الأزرق رودوبسين إلى ميتارودوبسين ، مما يؤدي إلى سلسلة إشارات وفتح قنوات أيونية محددة.
يؤدي هذا إلى تدفق الأيونات الإيجابي المستمر وإزالة الاستقطاب المستمر ، حتى بعد إزالة الضوء الأزرق - جهد إزالة الاستقطاب المطول ، أو المساعد الرقمي الشخصي ، المسجل بواسطة القطب.
الآن ، أعد تطبيق نبضات الضوء البرتقالي لتحويل ميتارودوبسين إلى رودوبسين.
هذا يوقف سلسلة الإشارات ، وينهي المساعد الشخصي الرقمي ، ويعيد استقطاب غشاء المستقبلات الضوئية.
ضع حامل الذبابة في قفص فاراداي مظلم على كتلة مغناطيسية ، وتأكد من أن الذبابة تبعد حوالي خمسة ملليمترات عن نهاية دليل الضوء. ضع قطب التسجيل فوق عين الذبابة ، والقطب الأرضي فوق الجزء العلوي من ظهر الذبابة باستخدام المعالجات الدقيقة. ثم أدخل القطب الأرضي في الجزء الخلفي من الذبابة باستخدام المعالجات الدقيقة.
أدخل قطب التسجيل في المحيط الخارجي لعين الذبابة ، ويفضل استخدام أجهزة المعالجة الدقيقة. أغلق قفص فاراداي ، وأطفئ الأنوار في الغرفة للسماح بالتكيف مع الظلام لمدة خمس دقائق. أدخل المعلمات ، بدءا من مدة نبضة تبلغ 500 متر في الثانية ، وفاصل نبض يبلغ 60 ثانية ، وعدد النبضات مضبوطة على ستة.
لقياس المساعد الشخصي الشخصي ، اضبط مولد نبض المعدل الرئيسي في وضع القطار. بعد ذلك ، أعط نبضة ضوئية مدتها 5 ثوان بأقصى كثافة باستخدام مرشح برتقالي. تحقق من استجابة الجهد. استبدل المرشح البرتقالي بمرشح أزرق عريض النطاق ، وأعط ثلاث نبضات ضوئية مدتها 5 ثوان بأقصى شدة. تحقق من استجابة الجهد.
انتظر 60 ثانية على الأقل في الظلام. استبدل المرشح الأزرق بالفلتر البرتقالي السابق. بعد ذلك ، أعط نبضتين ضوئيتين مدة كل منهما 5 ثوان بفواصل زمنية مدتها 60 ثانية. تحقق من استجابة الجهد.