JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 2:53 د • July 8th, 2025
قم بتأمين مستحضر جذع الدماغ والحبل الشوكي من قوارض حديثي الولادة في غرفة تسجيل مع تدفق aCSF المؤكسج. قم بإزالة الأنسجة الرقيقة التي تغطي المستحضر.
تولد الشبكة العصبية لجذع الدماغ نشاطا كهربائيا إيقاعيا ، يسمى انفجار الشهيق ، ينتقل عبر الخلايا العصبية الحركية في جذر العصب البطني الرابع للحبل الشوكي ، أو C4 ، للتحكم في التنفس.
ضع ماصة التسجيل بالقرب من جذر العصب واستخدم الشفط لسحب الجذر بالداخل ، لتشكيل ختم.
تتسبب الخصائص الجوهرية للخلايا العصبية في جذع الدماغ في تدفق الصوديوم ، وإزالة استقطاب الغشاء وتوليد جهد فعل ، يليه تدفق البوتاسيوم لإعادة الاستقطاب.
يمنع فرط الاستقطاب الناتج عن إمكانات عمل جديدة حتى يستخدم ATPase الصوديوم والبوتاسيوم ATP لاستعادة إمكانات الغشاء.
تنتشر إمكانات الفعل إلى جذر العصب على شكل رشقات نارية إيقاعية.
تدفق aCSF المحروم من الأكسجين لتعطيل إنتاج ATP وإضعاف وظيفة ATPase ، وتأخير إمكانات العمل وتقليل الرشقات النارية الإيقاعية.
يؤدي التبديل مرة أخرى إلى aCSF المؤكسج إلى استعادة عدد الرشقات النارية الإيقاعية.
في هذا الإجراء، ضع النسيج العصبي في غرفة التسجيل بحيث يكون جانبها البطني متجها لأعلى. قم بإصلاحه باستخدام دبابيس في الجزء السفلي من الحبل الشوكي ، والجزء الأكبر من جذع الدماغ. بعد ذلك ، قم بإزالة الغشاء العنكبوتي ، وهو نسيج رقيق يغطي سطح الأنسجة العصبية. احرص على عدم إزالة الأم والأوعية الدموية للأنسجة العصبية. بعد ذلك ، املأ القطب الكهربائي ب ACSF.
باستخدام مناور دقيق ، ضع القطب الكهربائي بحذر بالقرب من الجذر البطني الرابع. شفط جذر العصب برفق باستخدام المحقنة. ثم ضع القطب الكهربائي مع جذر العصب مقابل الحبل الشوكي. بعد ذلك ، قم بتسجيل الأنشطة الفيزيولوجية الكهربية الناتجة عن الأنسجة العصبية في ظل ظروف طبيعية لمدة 20 دقيقة على الأقل لتحديد المعلمات الأساسية للمستحضر.
قم بتبديل محلول التروية من ACSF الفقاعي بالكربوجين إلى محفز نقص الأكسجة ACSF ، وقم بالتسجيل لمدة 15 دقيقة. بعد ذلك ، قم بتبديل محلول التروية مرة أخرى إلى ACSF القياسي المليء بالكربوجين ، وقم بالتسجيل لمدة 15 دقيقة أخرى على الأقل قبل إنهاء التسجيل.
توضح هذه المقالة بروتوكولاً لإجراء تسجيلات كهرومغناطيسية على تحضيرات معزولة من جذع الدماغ والنخاع الشوكي للقوارض حديثة الولادة. تتيح هذه الطريقة للباحثين مراقبة مخرجات الشبكة التنفسية العصبية من خلال تسجيل دفقات الشهيق من الجذر العصبي البطني الرابع في كل من ظروف التزويد بالأكسجين وظروف نقص الأكسجين.
تتيح التسجيلات الفيزيولوجية الكهربائية من تحضيرات معزولة للجذع الدماغي والنخاع الشوكي استجوابًا دقيقًا لوظيفة الشبكة العصبية التنفسية تحت ظروف أيضية محكومة. يدعم هذا النهج تقليل المخاطر الآلية وتعزيز الثقة التنبؤية في مرحلة التحقق المبكرة من الأهداف العصبية، لا سيما بالنسبة للمسارات الحساسة للإجهاد الأيضي. وتوفر هذه الطريقة منصة قابلة للتكرار لتقييم مرونة الدوائر العصبية وتعافيها، مما يساهم في اتخاذ قرارات متعلقة بمجموعة المشاريع في مجالات الصيدلة العصبية والعلاجات التنفسية.
تتكامل هذه المنصة الفيزيولوجية الكهربائية ضمن سلسلة الاكتشافات، بدءاً من التحقق المبكر من الأهداف وصولاً إلى تطوير النماذج قبل السريرية لبرامج الأدوية التنفسية والعصبية.
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
آخر تحديث: 22 أغسطس 2026