JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 3:10 د • July 8th, 2025
ابدأ بفأر مخدر متكيف مع الظلام.
ضع قطرات مخدرة وموسعة على القرنية.
ضع الماوس على منصة مرتفعة أمام قبة ذات ضوء أحمر خافت.
قم بتأمين قطب كهربائي أرضي تحت الجلد على الساق الخلفية وقطب كهربائي مرجعي داخل الفم.
خذ حامل قطب كهربائي مع شعرية مملوءة بمحلول ملح. انقر لإزالة فقاعات الهواء.
املأ الطرف الشعري بالكامل بمحلول الملح.
ضع الشعيرات الدموية على القرنية لتسجيل مخطط كهربية الشبكية المقترن المباشر أو DC-ERG.
يقيس DC-ERG الاستجابات الكهربائية الدقيقة لظهارة صبغة الشبكية أو RPE.
RPE عبارة عن طبقة أحادية خلية متخصصة تحافظ على صحة الخلايا المستقبلة للضوء وسلامتها الهيكلية.
ضع قطرة من زيوت تشحيم العين للحفاظ على الموصلية ومنع الجفاف.
تحقق من قيم المقاومة لكل عين للتأكد من أنها متشابهة وضمن النطاق.
قم بإنشاء خط أساس ثابت ، ثم ابدأ في تسجيل DC-ERG.
لوضع الفأر والأقطاب الكهربائية لإجراء تجربة ، قم بتخدير قرنية الفأر المخدر بانخفاض 0.5٪ حمض بروباراكايين هيدروكلوريك قبل توسيع القرنية بانخفاض 2.5٪ فينيليفرين هيدروكلوريك و 0.5٪ تروبيكاميد.
استخدم الخطوة الأولى من السادسة لتشغيل ضوء أحمر خافت داخل القبة ووضع الماوس على طاولة تسجيل ساخنة. استخدم الملقط لخيمة جلد الساق الخلفية بعناية ، وباستخدام يد واحدة لإمساك قطب الإبرة بإحكام ، استخدم اليد الأخرى لإدخال القطب تحت الجلد في الساق الخلفية لتثبيت القطب في مكانه.
ضع قطب كلوريد الفضة / الفضة المرجعي في فم بحيث تستقر الحبيبات المركزية على طول الخد الخلفي ، ويتم تثبيتها في مكانها خلف الأسنان.
قبل وضع الأقطاب الكهربائية الشعرية على العين ، ضع حامل القطب الكهربائي مع توجيه الشعيرات الدموية الزجاجية عموديا ، ونفض الغبار عن حامل القطب بإصبع السبابة لإزالة أي فقاعات ربما تم إدخالها.
استخدم إبرة قياس 25 لملء الأطراف الشعرية باستخدام HBSS وفحص الشعيرات الدموية للتأكد من عدم وجود فقاعات هواء محاصرة في الأطراف. ضع حامل حامل القطب الكهربائي بحيث تكون الأطراف المفتوحة للشعيرات الدموية المملوءة ب HBSS على اتصال لطيف بالقرنية ، مع الحرص على تجنب إدخال الفقاعات ، وقلب موزع جل العين المزيوت للتخلص من القطرات الأولية. بعد ذلك ، ضع قطرة من جل العين المزيوت على كل عين للحفاظ على الموصلية ومنع الجفاف أثناء التسجيل.