موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:10 دقيقة • July 8th, 2025
ضع شريحة الحصين الفئران في إعداد الفيزيولوجيا الكهربية.
ضع الأقطاب الكهربائية المحفزة في طبقة الرادياتوم في منطقة الحصين CA1 ، والتي تتلقى إسقاطات محورية من الخلايا العصبية CA3.
ضع قطب تسجيل بالقرب من التشعبات القمية CA1.
ضع قطب تسجيل آخر في الطبقة الهرمية.
عند التحفيز ، تزيل الإسقاطات المحورية CA3 الاستقطاب وتولد إمكانات عمل ، وتطلق ناقلات عصبية مثيرة.
ترتبط هذه الناقلات العصبية بالتشعبات القمية CA1 بعد المشبكي ، مما يؤدي إلى تدفق الأيونات الإيجابي وإزالة الاستقطاب الغشائي ، والذي يطلق عليه إمكانات ما بعد المشبكي المثيرة ، أو EPSP.
يقيس قطب التسجيل EPSPs المجمعة من التشعبات القمية - المجال EPSP أو fEPSP. بمجرد الحصول على إشارات fEPSP مستقرة ، قم بخفض الأقطاب الكهربائية وتوقف مؤقتا لفترة وجيزة.
قم بتطبيق مجموعة من شدة التحفيز لتحديد علاقة المدخلات والمخرجات مع منحدر fEPSP ، ثم حدد وقم بتطبيق شدة محددة بناء على المنحدر.
يقيس قطب التسجيل الثاني إمكانات العمل المجمعة من أجسام الخلايا العصبية CA1 ، مما يؤدي إلى طفرات في عدد السكان.
في تجارب وضع العلامات والالتقاط المشبكي ، تحت المجهر ، ضع القطبين المحفزين في الطبقة الرادياتية لمنطقة CA1 لتحفيز ألياف Schaffer الجانبية وقطب تسجيل واحد في المنطقة التغصنية القمية ل CA1 في منتصف الطريق بين الأقطاب الكهربائية المحفزة لتسجيل استجابات fEPSP.
ضع قطب تسجيل آخر في الطبقة الهرمية لتسجيل ارتفاع عدد السكان. عندما تلمس جميع الأقطاب الكهربائية الشريحة ، قم بإجراء تحفيز اختبار لضمان إمكانية الحصول على إشارة EPSP مناسبة في كلا المدخلين.
بمجرد الحصول على إشارة fEPSP مناسبة ، قم بخفض الأقطاب الكهربائية بعناية بحوالي 200 ميكرون باستخدام مقابض الحركة الدقيقة للمعالجات ، ثم اترك 20 دقيقة حتى تتعافى الشريحة. بعد ذلك ، حدد علاقة المدخلات / المخرجات عن طريق قياس ميل EPSP المجال على نطاق من شدة التيار من 20 ميكروأمبير إلى 100 ميكروأمبير.
بعد ذلك ، لكل إدخال ، اضبط شدة التحفيز التي تستحضر 40٪ من الحد الأقصى لمنحدر EPSP للمجال كمنبهات ثابتة طوال التجربة. بعد 15 إلى 20 دقيقة ، ابدأ في تسجيل خط الأساس.
سجل خط أساس مستقر لمدة 30 إلى 60 دقيقة على الأقل قبل تحريض LTP / LTD.