تحميل وتفريغ صبغة FM بوساطة القطب الكهربائي الدقيق في ذبابة الفاكهة الخلايا العصبية

ابدأ باليرقات ذبابة الفاكهة ، مع العضلات والألياف العصبية المكشوفة المغمورة في محلول يحتوي على حويصلات من صبغة غشاء الفلورسنت ، أو صبغة FM.

ترتبط صبغة FM بالدهون في غشاء الخلية ، وتشكل طبقة فلورية فوقها.

باستخدام وحدة مناور دقيق ، ضع طرف القطب الكهربائي الدقيق للشفط تحت المجهر.

ركز على الألياف العصبية والقطب الصغير.

استخدم الضغط السلبي لامتصاص حلقة من الألياف العصبية في القطب الصغير.

تطبيق النبضات الحالية لتحفيز الألياف العصبية.

يؤدي هذا إلى الوصلة العصبية العضلية ، حيث تتصل الخلايا العصبية الحركية بألياف عضلية ، لبدء الالتقام الخلوي الحويصلي المتشابك.

خلال هذه العملية ، تبتلع الخلية الغشاء المطلي بصبغة FM لتشكيل حويصلات داخلية ملطخة ، وهي مثالية لتصور مراحل النقل العصبي قبل المشبكي.

اغسل صبغة FM واستبدل المحلول الخارجي.

قم بتطبيق النبضات الحالية لتفريغ الحويصلات الملطخة بصبغة FM خارج الخلية.

للتحفيز الكهربائي، قم بإعداد ماصة شفط باستخدام مجتذب القطب الكهربائي الدقيق للحصول على حجم الاستدقاق والطرف المطلوبين. بعد ذلك ، قم بتلميع طرف القطب الكهربائي الدقيق باستخدام مزور صغير لإنشاء نوبة محكمة عند امتصاص عصب حركي واحد.

حرك ماصة الشفط على حامل القطب الكهربائي الموجود على مناور دقيق، متصل بأنبوب بلاستيكي طويل ومرن وحقنة. بعد ذلك ، ضع المستحضر بصبغة FM على مرحلة المجهر وارفع المسرح حتى