في الجسم الحي تصوير الكالسيوم باستخدام مستشعرات الكالسيوم الموضعية بشكل متشابك في ذبابة الفاكهة السوداء

أصلح ذبابة مع كشف دماغها في غرفة التصوير.

تعبر الذبابة عن مؤشر كالسيوم مشفر وراثيا ، أو GECI موضعي في تشعبات جسم الفطر ، أو الخلايا العصبية MB.

قم بتوصيل الذبابة بأسلاك كهربائية وضع إبرة توصيل الرائحة بالقرب من هوائيها.

أضف قطرة عازلة على الدماغ المكشوف ، ضع الذبابة تحت المجهر ، وقم بتوصيل الإبرة بنظام توصيل الرائحة.

إثارة GECI وتقديم حافز للرائحة.

ترتبط الرائحة بمستقبلات الخلايا العصبية الحسية للهوائي ، مما يولد إمكانات عمل.

تنتشر إمكانات الفعل من الخلايا العصبية الحسية إلى الخلايا العصبية الإسقاط ، مما يؤدي إلى إطلاق الناقل العصبي وتسهيل تدفق الكالسيوم ومضان GECI في الخلايا العصبية MB بعد المشبكي.

كرر مع رائحة ثانية وثالثة.

بعد ذلك ، ضع الرائحة الأولى بصدمة كهربائية والثانية بدونها.

أخيرا ، قم بتوصيل الروائح الثلاثة بدون صدمات. سجل التألق.

يكشف التألق المنخفض استجابة للتحفيز المرتبط بالصدمة مقارنة بعناصر التحكم عن اللدونة المشبكية الناجمة عن التعلم.

لتصور مؤشرات الكالسيوم المستندة إلى GFP ، قم بضبط ليزر مجهر متعدد الفوتون المجهز بليزر الأشعة تحت الحمراء ، وهدف الغمر في الماء المثبت على طاولة معزولة بالاهتزاز ، إلى طول موجة إثارة يبلغ 920 نانومتر ، وقم بتثبيت مرشح تمرير النطاق GFP. باستخدام مقبض الضبط Z الخشن ، امسح المحور Z للدماغ لتحديد منطقة الدماغ التي تهمك.

استخدم وظيفة الاقت