موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:54 دقيقة • July 8th, 2025
ضع غطاء يحتوي على خلايا الكلى الجنينية التي تعبر عن القنوات الأيونية المعتمدة على الضوء وبروتين مراسل الفلورسنت على غرفة قياس مطبقة بالسيليكون. أغلقه وأضف مخزن مؤقت خارجي.
ضع هذه الغرفة تحت المجهر. ضع قطب حمام مملوء بالأجار. Perfuse مع مخزن مؤقت لإزالة الوسائط المتبقية والخلايا الميتة.
باستخدام مرشح مضان ، حدد الخلية المستهدفة وركز عليها.
قم بتوصيل ماصة رقعة بمعالج دقيق. اضغط لمنع الانسداد والاقتراب من الخلية.
ضع الماصة بالقرب من الخلية وحرر ضغطا موجبا لتشكيل رقعة غشائية عند الحافة.
بعد تشكيل رقعة الغشاء ، قم بالضغط السلبي لتمزيق الغشاء.
ضع ضوءا بطول موجي معين لفتح القنوات الأيونية. يتم تسجيل حركة الأيونات كتغيير في الجهد بواسطة القطب.
للبدء ، أغلق غرفة القياس بالسيليكون لمنع تسرب المخزن المؤقت الخارجي. ثم ضع غطاء واحد في الغرفة وأغلقه. املأ الغرفة بعناية بمخزن مؤقت خارج الخلية لمنع الخلايا من الانفصال. بعد ذلك ، ضع غرفة القياس تحت المجهر باستخدام هدف 40x لتصور الخلية.
بعد ذلك ، ضع جسر أجار فوق قطب الحمام وضعه في الغرفة مع مستشعر مستوى السائل ومخرج التروية لمعالج الحمام. استبدل المحلول خارج الخلية مرتين ب 1 ملليلتر من المحلول الخارجي الطازج لإزالة وسط الثقافة المتبقي والخلايا المنفصلة. اجعل الخلايا في بؤرة التركيز وابحث عن خلية منقولة ، والتي تحتاج إلى عزلها عن الخلايا الأخرى. بعد
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية