تأثير التحفيز المباشر للتيار على نوبات الصرع المستحثة في شرائح دماغ الفئران

خذ شريحة من دماغ الفأر تحتوي على المهاد الإنسي ، أو MT ، بارزة على القشرة الحزامية الأمامية ، أو ACC.

قم بتأمين الشريحة في غرفة مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية مزودة ب aCSF المؤكسج لتسجيل الإشارات الكهربائية.

ضع الأقطاب الكهربائية الموجبة والسالبة وقم بتطبيق تحفيز التيار المباشر ، أو DCS ، لتوليد مجال كهربائي عبر الشريحة.

قم بتعطيل DCS ووضع قطب كهربائي في MT. قم بتوصيل حافز لاستحضار إمكانات العمل في الخلايا العصبية المهادية ، مما يؤدي إلى إطلاق الناقل العصبي.

تؤدي

الناقلات العصبية إلى تدفق الأيونات في الخلايا العصبية ACC وتولد إشارات كهربائية تسمى الاستجابات المشبكية التي تثيرها التحفيز.

أعد تنشيط DCS لمراقبة تأثيراته على الاستجابات المشبكية ACC.

بعد ذلك ، قم بإلغاء تنشيط DCS وإدخال الأدوية المسببة للنوبات.

تزيد الأدوية من استثارة الخلايا العصبية ، مما يتسبب في أن ينتج المنبه المهادي رشقات نارية مستمرة من الإشارات في ACC ، والتي تسمى نوبات الصرع المستثارة.

أخيرا ، أعد تنشيط DCS لتقييم تأثيره على النوبات عن طريق قياس الانخفاض في سعة النوبة ومدتها.

في هذا الإجراء ، تأكد من توليد مجالات كهربائية موحدة عن طريق تمرير التيارات بين سلكين فضيين متوازيين مطلي بكلوريد الفضة يتم وضعهما داخل غرفة MEA. إذا لم تكن هناك مشكلات ، فيجب أن يظل DCS بين 0.5 و 2 مللي أمبير.

بعد ذلك ، قم بإيقاف تشغيل DCS وتحفيز المهاد باستخدام قطب التنغستن. للحصول على أقصى استجابات متشابكة في ACC ، سجل 10 إلى 20 استجابة ومتوسطها. ثم قم بتشغيل DCS وتحفيز المهاد في وقت واحد. تقييم تغيرات السعة لاستجابة ACC التي تثيرها التحفيز المهادي أثناء DCS.

الآن ، قم بإيقاف تشغيل DCS. أضف 250 ميكرومولار 4-AP و 5 ميكرومولار بيكوكولين إلى محلول التروية ، وانتظر ساعتين إلى ثلاث ساعات. إذا أثرت الأدوية على شريحة الدماغ ، فيجب أن تنتج الشريحة استجابات نوبات قشرية. بعد ذلك ، اجمع 10 إلى 20 استجابات قشرية حزامية أمامية وقم بقياس سعة ومدة استجابات النوبات القشرية المستحثة كهربائيا.

بعد ذلك ، قم بتشغيل DCS وتحفيز المهاد في وقت واحد. تقييم التغيرات في سعة ومدة استجابات النوبات القشرية المستحثة أثناء تطبيق DCS. بعد ذلك ، استبدل محلول التروية ب aCSF الطازج لغسل الأدوية.