Name: Intravitreous حقن لأمراض العين تأسيس النموذجي (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T12:45:27.000+00:00
Duration: 5 min 37 s
Description: تعلم تقنية الحقن الزجاجي لأبحاث أمراض العين باستخدام زاوية 45 درجة لتجنب إصابة العدسة. يوضح هذا البروتوكول الطريقة الصحيحة لتقليل النزيف والمضاعفات أثناء الإجراء.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وتدعم دراسة الزرق في هذا المختبر الوطني للأبحاث الزرق من مؤسسة الصحة الاميركية مساعد.

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اعداد الماصات الزجاج باستخدام ماصات مجتذب ، لأنه ربط حقنة 1ml ، وختم الاتصال مع parafilm. سحب 2 مل من محلول في غيض من الماصات والاستعداد للحقن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران عن طريق الحقن داخل الصفاق الكيتامين (80mg/kg) وزيلازين (8mg/kg) (نسبة حجم في 2:1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق قطرة واحدة من 0.5 ٪ إلى alcaine أعين الفئران كما التخدير الموضعي قبل الحقن intravitreous. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> موقف للفئران ، وتعريض المنطقة العلوية من الأنف والعين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام إبرة قياس 30 إلى ثقب الأنف المتفوقة الصلبة في مستوى مسطح الاسمية. تجنب لمس العين العضلات والأوعية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعطي ضغط العين الكرة خفيفة للتخلص من كمية صغيرة من الجسم الزجاجي من خلال ثقب ثقب من الغرفة الخلفية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج غيض من ماصة الزجاج من خلال ثقب ثقب في زاوية 45 درجة من خلال الصلبة في الجسم الزجاجي. حقن 2 مل من محلول في الغرفة الخلفية والاحتفاظ بها في مكان للعن بضع ثوان ، ثم إزالة الإبرة بلطف. تجنب لمس العدسة داخل العين والأوعية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الحقن intravitreous ، وتطبيق مرهم للعين Tobrex على العين الفئران لمنع العدوى. </li></ol>

<ol><li>Chiu, K., Lam, T. T., Ying Ku, W. W., Caprioli, J., Kwong Kwong, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calpain+and+N-methyl-d-aspartate+%28NMDA%29-induced+excitotoxicity+in+rat+retinas%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Calpain and N-methyl-d-aspartate (NMDA)-induced excitotoxicity in rat retinas.</a> Brain Research. 1046, 207-215 (2005).</li>
<li>Fisher, D., Pavlidis, M., Thanos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cataractogenic+lens+injury+prevents+traumatic+ganglion+cell+death+and+promotes+axonal+regeneration+both+in+vivo+and+in+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Cataractogenic lens injury prevents traumatic ganglion cell death and promotes axonal regeneration both in vivo and in culture.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41, 3943-3954 (2000).</li>
<li>Ji, J. -Z., Elyaman, W., Yip, H. K., Lee, V. W. H., Yick, L. -W., Hugon, J., So, K. -F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNTF+promotes+survival+of+retinal+ganglion+cells+after+induction+of+ocular+hypertension+in+rats%3A+the+possible+involvement+of+STAT3+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">CNTF promotes survival of retinal ganglion cells after induction of ocular hypertension in rats: the possible involvement of STAT3 pathway.</a> European Journal of Neuroscience. 19, 265-272 (2004).</li>
<li>Lam, T. T., Abler, A. S., Kwong, J. M. K., Tso, M. O. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-Methyl-D-Aspartate+%28NMDA%29-Induced+Apoptosis+in+Rat+Retina%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)-Induced Apoptosis in Rat Retina.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).</li>
</ol>

وقد تم التعامل مع هذه الحيوانات وفقا لبروتوكول لاستخدام الحيوانات في البحوث التي وافقت عليها لجنة استخدام حيوانات حية في التدريس والبحث (CULATR) من جامعة هونج كونج ورابطة للبحوث في مجال طب العيون والرؤية ببيانات عن استخدام الحيوانات في البحوث البصريات والرؤية.

حسن الحقن intravitreous مفيد لإنشاء النموذج الحيواني فضلا عن المعاملة داخل العين مباشرة. أولا ، يجب أن لا تعطل موقع الحقن بنية شبكية العين. وينبغي تجنب الثاني ، ونزيف للحد من مخاطر العدوى. وينبغي ألا تمس الثالثة ، ساد العدسة لتجنب الصدمة. الأكثر أهمية هو للحد من انقطاع بنية العين العادية.

<table><tbody><tr><td>مجهر جراحي</td><td>Olympus Corporation</td><td>OME</td><td></td></tr><tr><td>ماصات زجاجية</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>جهاز سحب الماصات</td><td>David Kopf Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>محاقن 1ml</td><td></td><td></td><td>استخدام واحد</td></tr><tr><td>إبر 30G</td><td></td><td></td><td>استخدام واحد</td></tr><tr><td>كيتامين</td><td>Aldasan</td><td></td><td>مخدر</td></tr><tr><td>زيلازين</td><td>Aldasan</td><td></td><td>مخدر</td></tr><tr><td>ألكاين</td><td>Alcon</td><td></td><td>0.5% proparacaine hydrochloride</td></tr><tr><td>توبريكس</td><td>Alcon</td><td></td><td>مرهم، 3% tobramyxin.</td></tr></tbody></table>

intravitreous حقن لأمراض العين تأسيس النموذجي

Intravitreous Injection for Establishing Ocular Diseases Model

حقن Intravitreous هو التقنية المستخدمة على نطاق واسع في بحوث العلوم البصرية. يمكن استخدامه لإنشاء النماذج الحيوانية مع أمراض العين أو التطبيق المباشر للعلاج المحلية. يقدم هذا الفيديو كيفية استخدام أدوات بسيطة وغير مكلفة لإنهاء إجراءات حقن intravitreous. ويستخدم استخدام حقنة 1 مل ، بدلا من الحقنة hemilton. يتم إعطاء نصائح عملية لكيفية جعل إبر الحقن المناسبة باستخدام ماصات زجاجية مع نصائح الكمال ، وكيفية الاتصال بسهولة إبرة حقنة مع ماصة الزجاج معا بإحكام. لإجراء الحقن intravitreous جيدة ، وهناك ثلاثة جوانب التي يجب مراعاتها : 1) موقع الحقن لا ينبغي أن يعطل بنية شبكية العين ، 2) وينبغي تجنب النزيف للحد من خطر العدوى ، 3) وينبغي ألا تمس عدسة ساد لتجنب الصدمة. باختصار ، فإن النقطة الأكثر أهمية هو للحد من انقطاع بنية العين العادية. لتجنب انقطاع من شبكية العين ، وقد تم اختيار المنطقة العلوية من الأنف العين الفئران. أيضا ، فإن النقطة ثقب الإبرة في مستو قدم المساواة ، والذي كان حوالي 1.5 ملم من المنطقة الحوفي من العين الفئران. يتم الضغط بلطف كمية صغيرة من السائل الزجاجي من خلال ثقب ثقب لتخفيض ضغط العين قبل الحقن. مع زاوية 45 ° الحقن ، فإنه من غير المحتمل ان يسبب صدمة الساد في العين الفئران ، وبالتالي تجنب المضاعفات المتصلة بها ، وتأثير العوامل من العدسية. في هذه العملية ، لم يكن هناك قطع للعضلات العين والملتحمة ، عدم وجود نزيف. مع إصابة طفيفة وسريعة ، يمكن القيام حقنة intravitreous ناجحة في غضون دقائق. تعيين الخطوط العريضة لحقن في هذا البروتوكول غير محددة خاصة للحقن intravitreous. ومع ذلك ، يمكن أيضا الأساليب والمواد المقدمة هنا يمكن استخدامها لحقن الإجراءات الأخرى في توصيل الدواء إلى الدماغ والنخاع الشوكي أو الأجهزة الأخرى في الثدييات الصغيرة.

حقن Intravitreous هو التقنية المستخدمة على نطاق واسع في بحوث العلوم البصرية لأمراض العين أو التطبيق المباشر للعلاج المحلية. أثبت هذا الفيديو على بروتوكول للحقن intravitreous باستخدام المحاقن 1ml مع ماصة الزجاج. يتم إعطاء نصائح مفيدة حول تجنب نزيف حاد وتلف العدسة.

Intravitreous حقن لأمراض العين تأسيس النموذجي

يُعد الحقن داخل الجسم الزجاجي تقنية واسعة الاستخدام في أبحاث العلوم البصرية؛ إذ يمكن استخدامه لإنشاء نماذج حيوانية تعاني من أمراض عينية أو كـ...

مرحباً، أنا TU من مختبر Guso. سأقوم اليوم بتعريفكم بكيفية إجراء الحقن داخل الجسم الزجاجي لنتمكن من إنتاج نموذج حيواني أو منع تطور الأمراض العينية. إليكم الصورة التخطيطية.لتوضيح موقع إبرة الحقن في العين الحمراء. يتم غرس الإبرة في الغرفة الخلفية بزاوية 45 درجة بالنسبة لسطح الندبة. وباستخدام هذه الزاوية البالغة 45 درجة، يمكننا تجنب إصابة العدسة.خلال الحقن داخل الجسم الزجاجي، نقوم بإجراء الحقن داخل العين باستخدام المجهر الجراحي. يتم تخدير الحيوان باستخدام مزيج من الكيتامين والكسيلزين. كما سيتم استخدام التخدير الموضعي ومرهم مضاد حيوي.نستخدم الماصات الزجاجية الدقيقة (glass pipettes) لإجراء عملية الحقن. ونستخدم جهاز سحب الأنابيب (puller) المُعد مسبقاً لتجهيز الماصات الزجاجية. بعد ذلك، نحتاج إلى إزالة الطرف الحاد جداً من الماصة الزجاجية.يمكننا توصيلها باستخدام محقنة سعة 1 مليون. سنقوم بسد نقطة التوصيل باستخدام مادة لاصقة. بعد ذلك، وباستخدام هذا الأنبوب الزجاجي، يمكننا سحب 2 µL من محلول الحقن ببطء وبدقة إلى الداخل، ثم نضع العينة الحمراء تحت المجهر.ضع قطرة واحدة من التخدير الموضعي على السطح، ثم قم بتصريف السائل الزائد. استخدم إبرة بقياس 30 G للثقب عبر الندبة. يجب أن تكون الإبرة عمودية على سطح الندبة، مع إدخال طرف الإبرة فقط.يمكنكم أن تلاحظوا خروج بعض السوائل من ثقب الوخز. اضغط بلطف للتخلص من المزيد من السوائل لتوفير مساحة أكبر. في الغرفة الخلفية للعين الحمراء، أدخل طرف المسبار الزجاجي في الثقب بزاوية 45 درجة بالنسبة لسطح الندبة.حاول تجنب إصابة العدسة. قم بالحقن ببطء. لا تحقن أي فقاعات هوائية في الـ Es. بعد الانتظار لبضع ثوانٍ، قم بإخراجه.بعد ذلك، يتم وضع مرهم مضاد حيوي على العين. يتمثل التحدي الرئيسي في الحقن داخل الجسم الزجاجي في تقليل التعامل المباشر مع العين؛ إذ يجب تجنب حدوث نزيف داخل العين، أو إصابة العدسة، أو انفصال الشبكية.

intravitreous-injection-for-establishing-ocular-diseases-model

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

يوضح هذا الفيديو طريقة لإنشاء نموذج فأر لالتهاب القزحية الفطري (PMU) لدراسة التهاب القزحية التالي للعدوى. عند تحريض PMU عن طريق الحقن داخل الجسم الزجاجي لبكتيريا السل المقتولة بالحرارة في فأر تم تحصينه مسبقا بنفس الجين المناعي ، يتم تحليل تطور الالتهاب المزمن في العين باستخدام التصوير والفحص النسيجي...

نموذج فأر لالتهاب القزحية الفطري المفعم لدراسة التهاب القزحية التالي للعدوى

يوضح هذا الفيديو تقنية تصوير في الجسم الحي للكشف عن التهاب العين وقياسه في نموذج فأر لالتهاب القزحية التالي للعدوى. تولد هذه التقنية ، المعروفة باسم التصوير المقطعي للتماسك البصري (OCT) ، صورا مقطعية عالية الدقة للعين لتقييم تطور المرض.

التصوير المقطعي بالتماسك البصري لتقييم التهاب القزحية في نموذج الفأر

المصدر: Park, S. W., et al. النهج الحزوي - الحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية للعلاج الجيني في الفئران صبغة الشبكية الظهارية. J. Vis. Exp. (2015)يصف الفيديو طريقة الحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية في ظهارة صبغة الشبكية (RPE) في نموذج الفأر. يفصل الإجراء من التخدير وإعداد العين إلى التوصيل الدقيق لنواقل الفيروسات ، مما يضمن تكامل الجينات والتعبير عنها في RPE.

الحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية في ظهارة صبغة الشبكية في نموذج الفأر

تستخدم الأرانب على نطاق واسع لدراسة الحرائك الدوائية للأدوية داخل العين. نصف طريقة لإجراء دراسات الحرائك الدوائية للأدوية داخل العين باستخدام عيون الأرانب.

استخدام الأرنب عيون في دراسات حركية الدواء من داخل بصري المخدرات

هنا نظهر نهجاً جديداً لاستخدام التصوير المقطعي التماسك الضوئية المجال الطيفي عالية الدقة (الموارد البشرية-التنمية المستدامة-أكتوبر) لمساعدة إيصال وكلاء العلاج الجيني في الفضاء سوبريتينال وتقييم تغطية مساحية وتميز حيوية مستقبله.

القرار أولتراهيغ الماوس الضوئية التماسك التصوير المقطعي لمساعدة الحقن داخل مقلة العين في أبحاث العلاج الجيني الشبكية

نحن نصف هنا طريقة الحقن داخل في الواقع والكمية البكتيرية اللاحقة في نموذج الماوس من التهاب بطانة الرحم البكتيرية. ويمكن تمديد هذا البروتوكول لقياس الاستجابات المناعية المضيفة والبكتيرية والمضيفة الجينات التعبير.

الحقن داخل القلبية وكمية من المعلمات العدوى في نموذج الماوس من التهاب Endophthalmitis البكتيرية

يحدد هذا البروتوكول خطوات إحداث التهاب القزحية المتفطر (PMU) في الفئران. تحدد هذه الطريقة الخطوات للمساعدة في إنتاج التهاب عين موثوق وقوي في نظام نموذج الماوس. باستخدام هذا البروتوكول ، قمنا بتوليد عيون UVEITIC وعيون زميلة غير ملتهبة من مفردة لمزيد من التقييم باستخدام المقايسات المناعية والنسخية والبروتينية.

التهاب العنبية المتفطر (PMU) كنموذج لالتهاب العنبية بعد العدوى

تم إجراء الحقن داخل الجسم الزجاجي في عين الأغنام بهدف تقديم العلاج الجيني بوساطة فيروسية إلى شبكية العين.

الحقن داخل الجسم الزجاجي في عين الأغنام

يصف هذا البروتوكول تقنية للحقن داخل الكاميرا في الفئران باستخدام شق مركزي في القرنية ونفق طويل في الغرفة الأمامية. تقلل طريقة الحقن هذه من خطر إحداث تلف غير مقصود للأنسجة وبالتالي تحسن الدقة والتكاثر.

الحقن داخل الكاميرا في الفئران ذات المخاطر المنخفضة للآثار الضارة

يصف هذا البروتوكول تقنية فريدة باستخدام نهج عبر الملتحمة للوصول إلى العصب البصري للفئران للحقن.

نهج عبر الملتحمة للحقن في العصب البصري للفئران

تقدم هذه الدراسة منهجية لتوصيل العلاجات إلى شبكية العين والأعصاب البصرية للفئران البالغة. بالإضافة إلى ذلك ، يتم تقديم طريقة فريدة لاسترجاع الأنسجة لمجموعة من أعلى إلى أسفل من العصب البصري وشبكية العين في الفئران البالغة.

التوصيل العلاجي للعين واسترجاع الأنسجة المتقدم في الفئران البالغة

تعلم تقنية الحقن الزجاجي لأبحاث أمراض العين باستخدام زاوية 45 درجة لتجنب إصابة العدسة. يوضح هذا البروتوكول الطريقة الصحيحة لتقليل النزيف والمضاعفات أثناء الإجراء.

Intravitreous حقن لأمراض العين تأسيس النموذجي

استكشف المزيد من الفيديوهات