JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 2:47 د • July 8th, 2025
املأ الشعيرات الدموية لحقن الزجاج بمحلول من ببتيدات الأميلويد أحادية اللون الاصطناعية ، وهي ببتيدات غير طبيعية ذات خصائص معرضة للتجميع.
أدخل الشعيرات الدموية في حامل الحقن المجهري.
ضع سمكة الزرد في نفس الوقت في طبق بتري يحتوي على محلول مخدر.
بمجرد تخدير السمكة ، أمسكها بشكل جانبي بالملقط لتأمين الرأس.
قم بعمل شق صغير في جمجمة السمكة عند تقاطع الصفيحتين الجانبيتين للوصول إلى الدماغ الأمامي الغني بالخلايا العصبية.
الآن ، أدخل الإبرة الشعرية من خلال الشق ، وحقن محلول الببتيد النشواني في الدماغ الأمامي.
انقل سمك الزرد إلى وعاء استرداد به ماء متداول.
داخل الدماغ الأمامي ، تتراكم ببتيدات الأميلويد بالقرب من الخلايا العصبية.
تسوء هذه الببتيدات تلقائيا لتشكيل صفائح بيتا وتتجمع حول الخلايا العصبية لتشكيل لويحات أميلويد سامة.
تتلف هذه اللويحات الخلايا العصبية وتضعف نقل الإشارات.
هذا يؤسس نموذجا لسمك الزرد لمرض الزهايمر ، وهو اضطراب في الدماغ يتميز بلويحات الأميلويد.
استخدم مجتذب إبرة مع المعلمات الموضحة في بروتوكول النص ، لإعداد الشعيرات الدموية لحقن الزجاج. اضبط إعداد الضغط على مصدر الضغط على 25 رطل لكل بوصة مربعة. بعد ذلك ، على الحاقن الصغير ، اضبط ضغط التثبيت على 20 رطل لكل بوصة مربعة ، وضغط الإخراج على 10 رطل لكل بوصة مربعة ، وقيمة الفترة إلى 2.5 ، وقيمة البوابة على 100 مللي ثانية. بعد ذلك ، قم بتحميل الشعيرات الدموية الزجاجية بمحلول الحقن.
بعد ذلك ، أدخل الشعيرات الدموية الزجاجية في حامل الحقن الصغير ، واضبط زاوية الحقن على 45 درجة. ضع سمكة واحدة في طبق بتري جديد مليء بمحلول التخدير. بمجرد تخديرها ، امسك السمكة بالملقط ووجهها للحقن. باستخدام طرف إبرة قياس 30 ، قم بإنشاء شق في الجمجمة فوق التكتوم البصري حيث تلتقي الصفيحتان الجانبيتان. استخدم فقط طرف الإبرة ، ولا تخترق أكثر من 1 ملم من خلال الجمجمة.
ثم ، مع الاستمرار في حمل السمكة ، أدخل طرف الشعيرات الدموية الزجاجية من خلال موقع الشق. قم بتوجيه طرف الشعيرات الدموية الزجاجية نحو telencephalon بزاوية 45 درجة ، ثم قم بحقن 1 ميكرولتر من المحلول. ضع السمكة مرة أخرى في وعاء النقل حتى تتعافى. بعد ذلك ، قم بتوصيله بالحاوية بمياه السمك المتداولة بانتظام لضمان جودة المياه المثلى.