موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:48 دقيقة • May 29th, 2025
ابدأ بإعداد مجهر مضان يحتوي على غشاء ثابت مع أعصاب فرينيك من فأر معدل وراثيا.
يتكون الوصلة العصبية العضلية للحجاب الحاجز من خلية عصبية حركية وألياف عضلية وخلايا شوان تحتوي على مستقبلات الأسيتيل كولين وقنوات الكالسيوم.
هذه الخلايا لديها مستقبلات أستيل كولين وصفت بالفلورسنت وعبر عن مؤشرات الكالسيوم داخل الخلايا.
يتيحمقسم الصور المتصل بالإعداد التصور المتزامن لكل من إشارتي الفلورسنت.
يتم وضع العصب الحجابي في قطب شفط لإيصال التحفيز الكهربائي.
تحت المجهر الفلوري ، تصور مستقبلات الأسيتيل كولين لتحديد الوصلة العصبية العضلية.
لتعيين أقصى مضان أساسي ، أضف محلول كلوريد البوتاسيوم لإزالة استقطاب غشاء الخلية مؤقتا. يؤدي هذا إلى تدفق الكالسيوم داخل الخلايا ، مما يؤدي إلى زيادة تألق المؤشرات.
اضبط إعدادات السطوع لمنع التشبع المفرط لإشارة التألق.
بعد إعادة الاستقطاب ، قم بتطبيق المحفزات الكهربائية لتحفيز تدفق الكالسيوم إلى الخلية وتسجيل التغيير في التألق داخل الخلايا بمعدل إطارات مرتفع.
عند تكبير 20 مرة ، حدد موقع شريط اللوحة الطرفية في مركز العضلات من خلال البحث عن التقاطعات العصبية العضلية ألفا-بونجاروتوكسين المسماة بالفلورسنت تحت إثارة الضوء الأصفر الأخضر. قم بالتبديل إلى إثارة الضوء الأزرق لتصوير استجابات الكالسيوم في خلايا العضلات أو الخلايا العصبية الحركية أو خلايا شوان. في هذا المثال ، يتم التع
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية