تصور تكوين المشابك للخلايا العصبية الحبيبية المخيخية في مراحل النمو المختلفة

ابدئي بشرائح أنسجة المخ الثابتة مسبقا التي تم جمعها من مراحل الفئران المبكرة والمتأخرة بعد الولادة.

تحتوي الشريحة على خلايا عصبية حبيبية مخيخية ، أو CGNs ، تعبر عن بروتين الفلورسنت.

باستخدام المجهر متحد البؤر ، ركز على CGN فلوري واحد.

التقط صورا z-stack على أعماق متفاوتة لإنشاء عرض ثلاثي الأبعاد للخلايا العصبية.

باستخدام برنامج التصوير ، تتبع الخلايا العصبية أو الإسقاطات الطويلة ، بما في ذلك التشعبات والمحاور.

قياس طول التغصنات من جسم الخلية إلى طرفها.

تحليل تكوين المخلب الشجيري ، والهياكل المتخصصة في أطراف التغصنات حيث يتم تلقي إشارات من الخلايا العصبية الأخرى.

أيضا ، قم بتقييم مساحة سطح الخلايا العصبية وحجمها.

في مرحلة ما بعد الولادة المبكرة ، تظهر الخلايا العصبية عددا متزايدا من التشعبات ، مع عدم تكوين مخلب.

وفي الوقت نفسه ، في مرحلة ما بعد الولادة المتأخرة ، يوجد عدد أقل من التشعبات ، لكن أطوالها وعدد المخالب يزداد.

وهكذا ، مع تقدم العمر ، تخضع CGNs لتكوين التشابك الشبكي وتشكل اتصالات مع خلايا أخرى لنقل الإشارات.

لدراسة مورفولوجيا CGNs المفردة المثقبة بالكهرباء من أقسام الدماغ السهمية للجرو التجريبي ، التقط صورا مكدس z بمعدل 0.5 ميكرومتر لكل كومة على مجهر متحد البؤر. صورة خلية واحدة لكل نافذة صورة للسماح بتحليل الصور بسهولة وإعادة البناء ثلاثية الأبعاد. تحليل طول العصبات وتشكيل المخلب