موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:53 دقيقة • May 29th, 2025
خذ غطاء مع ثقافة الخلايا العصبية البطنية في الدماغ المتوسط المشتقة من أجنة الفئران.
تصاب الخلايا بناقل فيروسي للتعبير عن مؤشر الكالسيوم.
انقل قسيمة الغطاء إلى غرفة التسجيل الخاصة بمجهر متحد البؤر مليء بمخزن مؤقت للتسجيل.
باستخدام الضوء المرئي ، حدد منطقة تحتوي على خلايا عصبية متعددة ، ثم انتقل إلى التصوير الفلوري.
عند مستويات الكالسيوم المنخفضة داخل الخلايا ، يظل المؤشر غير مرتبط ، مما يظهر كثافة مضان منخفضة.
تولد الخصائص الجوهرية للخلايا العصبية إمكانات عمل تلقائية ، مما يؤدي إلى فتح قنوات الكالسيوم ذات الجهد الكهربائي والسماح بتدفق الكالسيوم.
يرتبط الكالسيوم الزائد بالمؤشر ، مما يؤدي إلى تغيير توافقي يزيد من شدة التألق.
سجل شدة التألق بمرور الوقت لتتبع نشاط الكالسيوم التلقائي.
أدخل ناقلا عصبيا بتركيز عال ، والذي يرتبط بالمستقبلات الموجودة على الخلايا العصبية ، مما يولد إمكانات عمل مستمرة.
يؤدي تنشيط قناة الكالسيوم المستمر بالجهد الكهربائي إلى إطالة تدفق الكالسيوم ، مما يتسبب في زيادة مستمرة في شدة التألق.
قم بإعداد 1 لتر من المخزن المؤقت لتسجيل HEPES ، و 200 مل من 20 مخزن مؤقت لتسجيل الغلوتامات الدقيقة ، و 200 مل من 10 ميكرومولار للتسجيل NBQX وفقا لتوجيهات المخطوطة. املأ طبق بتري معقم بحجم ملليمتر ب 3 ملليلتر من المخزن المؤقت للتسجيل.
خذ طبق بتري مع الثقافات المصابة من الحاضنة ، ثم أمسك ب
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية