استخدام قياس الانعكاس الطيفي لتحديد أقطار المحور العصبي النخاعي في شريحة دماغ الفأر الثابتة

خذ مجهر متحد البؤر فائق الطيف مع مصدر ليزر مستقر تم تكوينه لنطاق طيفي واسع لفك تشفير البنية النانوية لغمد المايلين لأنسجة المخ.

استخدم مرآة مرجعية لالتقاط طيف الانعكاس الأساسي. قم بإزالة المرآة واحصل على طيف إزاحة داكن لتصحيح ضوضاء الكاشف.

انقل غرفة بها قسم ثابت من أنسجة المخ إلى مرحلة المجهر.

قم بمحاذاة المستوى البؤري مع منطقة الأنسجة محل الاهتمام ، مما يضمن العمق الكافي لتقليل التداخل من واجهة الأنسجة الزجاجية.

يتم توجيه ضوء الليزر إلى غمد المايلين متعدد الطبقات من المحاور.

عندما يتفاعل الضوء مع المايلين ، تحدث انعكاسات جزئية في واجهات الطبقات ، مما ينتج عنه أنماط تداخل بسبب سماكة الطبقة المتفاوتة ومؤشرات الانكسار.

الحصول على صور طيفية لمخططات التداخل هذه.

بعد تصحيح خط الأساس وتحليل الإشارة ، يكشف طيف الانعكاس عن دورية الرقم الموجي ، مما يسمح بتحديد أقطار المحور العصبي النخاعي.

قم بتركيب مرآة مرجعية على مرحلة المجهر ، بحيث يكون السطح مواجها للعدسة الموضوعية. إذا لم يكن من السهل وضع المرآة على مرحلة المجهر ، فقم بلصق مرآة على اللوحة المسطحة. اضبط مرحلة المجهر لمحاذاة المستوى البؤري مع سطح المرآة. بعد ذلك ، اضبط كسب PMT وقوة الليزر ، مع مراعاة النطاق الديناميكي للكاشف.

تحت لون زائف ، تحقق من عدم وجود تشبع في جميع أنحاء نطاق الطول الموجي. إذا لوحظ التشبع ، فقم بخفض طاقة الليزر. ثم قم بتشغيل