استخدام قياس الانعكاس الطيفي لتحديد أقطار المحور العصبي النخاعي في شريحة دماغ الفأر الثابتة

0 مشاهدات4:16 د • May 29th, 2025

خذ مجهر متحد البؤر فائق الطيف مع مصدر ليزر مستقر تم تكوينه لنطاق طيفي واسع لفك تشفير البنية النانوية لغمد المايلين لأنسجة المخ.

استخدم مرآة مرجعية لالتقاط طيف الانعكاس الأساسي. قم بإزالة المرآة واحصل على طيف إزاحة داكن لتصحيح ضوضاء الكاشف.

انقل غرفة بها قسم ثابت من أنسجة المخ إلى مرحلة المجهر.

قم بمحاذاة المستوى البؤري مع منطقة الأنسجة محل الاهتمام ، مما يضمن العمق الكافي لتقليل التداخل من واجهة الأنسجة الزجاجية.

يتم توجيه ضوء الليزر إلى غمد المايلين متعدد الطبقات من المحاور.

عندما يتفاعل الضوء مع المايلين ، تحدث انعكاسات جزئية في واجهات الطبقات ، مما ينتج عنه أنماط تداخل بسبب سماكة الطبقة المتفاوتة ومؤشرات الانكسار.

الحصول على صور طيفية لمخططات التداخل هذه.

بعد تصحيح خط الأساس وتحليل الإشارة ، يكشف طيف الانعكاس عن دورية الرقم الموجي ، مما يسمح بتحديد أقطار المحور العصبي النخاعي.

قم بتركيب مرآة مرجعية على مرحلة المجهر ، بحيث يكون السطح مواجها للعدسة الموضوعية. إذا لم يكن من السهل وضع المرآة على مرحلة المجهر ، فقم بلصق مرآة على اللوحة المسطحة. اضبط مرحلة المجهر لمحاذاة المستوى البؤري مع سطح المرآة. بعد ذلك ، اضبط كسب PMT وقوة الليزر ، مع مراعاة النطاق الديناميكي للكاشف.

تحت لون زائف ، تحقق من عدم وجود تشبع في جميع أنحاء نطاق الطول الموجي. إذا لوحظ التشبع ، فقم بخفض طاقة الليزر. ثم قم بتشغيل عملية الاستحواذ على مسح lambda. قم بإزالة المرآة من المسرح ، وكرر نفس الاستحواذ بدون عينة من أجل الحصول على المرجع المظلم. بعد ذلك ، احفظ البيانات بتنسيق TIFF متعدد المكدسات.

لإجراء الحصول على صورة SpeRe ، ضع الأنسجة المثبتة على مرحلة المجهر. لمحاذاة الأنسجة تقريبا مع المستوى البؤري للعدسة الشيئية ، من خلال عدسة ، استخدم وضع التألق واسع المجال. مع تشغيل الفحص المباشر ، تحكم في مرحلة المجهر لمحاذاة المستوى البؤري مع منطقة الاهتمام في الأنسجة. لتجنب ضوضاء الخلفية من الغطاء ، حدد منطقة مستهدفة بعمق 15 ميكرومتر على الأقل من واجهة الأنسجة الزجاجية.

احصل على مكدس الصور الطيفية للمنطقة المستهدفة باستخدام نفس الإجراء كما هو موضح سابقا في هذا الفيديو. بعد ذلك ، احفظ البيانات الخاصة بالأنسجة والإزاحة الداكنة بتنسيق TIFF متعدد التكدس. لمعالجة الصور في ImageJ، افتح البيانات الطيفية للمرآة المرجعية وأنسجة الدماغ.

حدد عائد الاستثمار لمكدسات الصور المفتوحة ، والمنطقة المركزية للمرآة المرجعية ، وجزء من ألياف محورية لأنسجة الدماغ. بعد ذلك ، قم بتشغيل الصورة ، والمكدسات ، ومخططات ملف تعريف المحور z للحصول على الأطياف الأولية لعائد الاستثمار المحدد.

قد تكون ألياف المحور العصبي غير متجانسة هيكليا على طول أطوالها ، وبالتالي يوصى باختيار عائد الاستثمار على جزء محوري صغير ، عادة أقل من 5 ميكرومتر ، لتقليل القطع الأثرية ذات الحجم الجزئي.

افتح بيانات الإزاحة المظلمة ، أحدها مأخوذ للمرآة المرجعية ، والآخر مأخوذ لأنسجة المخ ، وارسم ملف تعريف المحور z كما هو موضح للتو. بعد ذلك ، استخدم خيارات النسخ واللصق لحفظ جميع الخيارات المكتسبة.

14:28

الاستفادة المشتركة منهجيات لتحديد دور البلازما غشاء تسليم خلال أكسون التشعب والعصبية التشكل

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:56

التصور الملاحة إكسون موتور والتحديد الكمي أربوريزيشن إكسون في الأجنة الماوس استخدام الورقة الضوء الفلورية مجهرية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:07

بصريات غير خطية خالية من الملصقات لدراسة العيوب المعتمدة على التوبولين في المايلين المركزي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:41

والفحص عن عضوي النمط شريحة الوقت الفاصل بين التصوير عالية الدقة للهجرة الخلايا العصبية في الدماغ بعد الولادة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:52

دراسة الفيزيولوجية الكهربية للمشابك الشبكية والكورتيكوجينيكولات في شرائح دماغ الفأر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

02:55

قياس النشاط العصبي في شريحة دماغ الفأر بعد الحضانة لفترات طويلة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:28

الفحص المجهري ثنائي الفوتون لدراسة انجذاب العملية الدبقية المجهرية نحو مركب في شريحة دماغ الفأر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:19

تصور مورفولوجيا الخلايا النجمية باستخدام الرحلان الأيوني للصبغة الفلورية في شريحة دماغ الفأر الثابتة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:00

التحليل الطيفي المتماسك المضاد للستوكس رامان لتصور الخلايا العصبية النخاعية في أنسجة دماغ الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:35

تصوير الكالسيوم اثنين-فوتون في Dendrites العصبية في الدماغ شرائح

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 29 أغسطس 2026