موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:40 دقيقة • May 29th, 2025
خذ جزءا من الأنسجة الثابتة والمقاصة كيميائيا من جنين فأر معدل وراثيا يعبر عن البروتين الفلوري الأخضر (GFP) في الخلايا العصبية الحركية للعمود الفقري.
قم بتركيب الأنسجة عموديا على طرف ماصة معدل.
قم بتوصيل الطرف بالشعيرات الدموية المثبتة داخل مجهر مضان الورقة الخفيفة.
ضع حجرة عينة مملوءة بالعازلة أسفل الأنسجة لغمرها وإزالة الحطام.
باستخدام برنامج التصوير، قم بمحاذاة الأنسجة في مسار الضوء.
ابدأ الحصول على الصورة.
ينبعث مصدر الضوء من ورقة رقيقة من ضوء الليزر ، ومثير GFPs في مستوى واحد من الأنسجة لإصدار تألق.
يلتقط الكاشف الموجود بشكل عمودي على مسار الضوء التألق المنبعث.
الحصول على صور للخلايا العصبية الحركية الشوكية لتوليد إعادة بناء ثلاثية الأبعاد لمورفولوجيا التفرع المحوري.
استخدم البرنامج لتعيين المحاور العصبية وتحديد الأنماط المتفرعة ونقاط النهاية لتقييم نمو الخلايا العصبية الحركية والاتصال.
قم بإعداد بصريات الإضاءة 5X / 0.1 وبصريات الكشف 5X / 0.16. قم بتجميع حامل العينة والعينة الشعرية. تحضير غرفة العينة عن طريق ملئها بمحلول المقاصة. لتركيب الجنين، قم بإعداد طرف ماصة P200 عن طريق قطع الجزء العلوي بحيث يناسب قطر الشعيرات الدموية، وقم بإزالة الجزء المدبب لمرفق العينة.
ثم قم بإذابة الطرف الضعيف لطرف الماصة باستخدام لهب صغير. أطفئ اللهب وقم بإرفاق الجنين بسرعة عموديا على الطرف الذائب. قم بتركيب
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية