موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:13 دقيقة • May 29th, 2025
خذ محلول الاغاروز المسخن مسبقا الذي يحتوي على يرقة سمك الزرد المعدلة وراثيا مخدرة تعبر عن بروتين فلوري في الخلايا العصبية الحركية الشوكية.
انقل اليرقة إلى طبق زجاجي بحلقة الاغاروز.
باستخدام المجهر ، اقلب اليرقة على جانبها. ثم اسمح للأغروز بالتصلب ، مما يؤدي إلى شل حركة اليرقة.
أضف عازلة تحتوي على مخدر للحفاظ على التخدير.
ضع الطبق على مرحلة المجهر متحد البؤر واستخدم التصوير الساطع لتحديد منطقة الحبل الشوكي الظهري.
قم بالتبديل إلى وضع التألق لتصور الخلايا العصبية الحركية الفلورية.
حدد المستوى z المركزي لسوما الخلية لاستهداف الاستئصال بدقة.
تكوين معلمات التصوير للحصول على دقة عالية مع تقليل التلف الضوئي.
بمجرد أن يصبح المستوى z المطلوب في بؤرة التركيز ، قم بإجراء الاستئصال على منطقة الخلايا العصبية المستهدفة باستخدام ليزر فوق بنفسجي مركز.
تعطل طاقة الليزر الهياكل الخلوية ، مما يتسبب في فقدان التألق وموت الخلايا. يؤكد فقدان التألق الذي لا رجعة فيه الاستئصال الدقيق دون التأثير على الخلايا المحيطة.
استخدم ماصة قابلة للتعديل لسحب يرقة واتركها تغرق في أسفل الحافة. قم بإسقاط اليرقة في الحد الأدنى من السائل في الاغاروز المسخن مسبقا ، ثم ارسم السمكة مع الاغاروز وقم بتوزيعها بسرعة في طبق زجاجي معد مسبقا بحجم 35 ملم. تحت مجهر التشريح ، استخدم فرشاة رسم قياسية لوضع ، أو متعددة ، داخل الاغاروز على جو
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية