موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:28 دقيقة • May 29th, 2025
ابدأ بورقة الميكا مع عديد التصاق المعزول من أنسجة دماغ الفئران.
متعدد الجسيمات هو مركب من الريبوسومات المتعددة المرتبطة بخيط الحمض النووي الريبي.
باستخدام شريط لاصق ، قم بتثبيت ورقة الميكا بحامل العينة.
ضع حامل العينة في مرحلة مجهر القوة الذرية.
ضع الكابولي المركب مسبقا. قم بمحاذاة الليزر والكاشف لضمان اكتشاف دقيق للإشارة أثناء التصوير.
اضبط تردد التذبذب للناتئ لتحسين اكتشاف ميزات السطح مع الحفاظ على سلامة العينة.
ابدأ التصوير عن طريق تذبذب طرف الكابولي فوق سطح العينة.
عندما يواجه الطرف سطحا مرتفعا من البولي سوم ، ينحرف الليزر.
يتم التقاط هذه الانحرافات في الليزر بواسطة الكاشف ، والذي يولد صورة بدقة نانوية.
استخدم البرنامج المناسب لتصحيح تأثيرات الإمالة والانجراف التعسفية ، مما يتيح تصور متعدد التجسيم.
قم بتوصيل العينة المحضرة بحامل عينة AFM باستخدام شريط على الوجهين. بعد ذلك ، أدخل حامل العينة في مرحلة AFM وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. بعد المعايرة ، اقترب من العينة حتى يشبك طرف الكابولي السطح.
حدد منطقة مسح ضوئي مقاس 2 × 2 ميكرون ، بدقة لا تقل عن 512 × 512 بكسل. اختر وضع طرح الخلفية الحية وحدد مقياس Z من 20 إلى 25 نانومتر. ثم ابدأ في الحصول على الصور. افحص الصورة ، وابحث عن وجود أجسام مستديرة تتميز بارتفاع يتراوح بين 10 و 15 نانومتر عند الحصول على صور في الهواء.
بعد ذلك ، اضبط نقطة الضبط ومعلمات التغذية الراجعة حتى يتم تصور الكائنات الحادة. يجب أن تظهر الخلفية مسطحة نسبيا في العينات الجيدة مع أجسام يبلغ ارتفاعها حوالي 2 إلى 4 نانومتر. بمجرد أن تبدو الصورة جيدة ، احصل على عدة عمليات مسح 2 × 2 ميكرون في مناطق عينة مختلفة.