موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:03 دقيقة • May 29th, 2025
خذ شريحة زجاجية تحتوي على أقسام أنسجة دماغ الفئران ملطخة بالمناعة لمستقبلات AMPA و NMDA في الخلايا العصبية اللوزة.
تتوسط مستقبلات AMPA تدفق الصوديوم الناجم عن الغلوتامات والانتقال المشبكي الضداجي السريع.
في المقابل ، تتوسط مستقبلات NMDA الغلوتامات وتدفق الصوديوم والكالسيوم الناجم عن ناهض مشترك ، مما يسهل الانتقال المشبكي المثير البطيء.
يتمتلطيخ المستقبلات بالأجسام المضادة الأولية ويتم اكتشافها باستخدام الأجسام المضادة الثانوية الموسومة بالفلوروفور بالأشعة تحت الحمراء القريبة.
ضع جانب الأنسجة المنزلقة لأسفل على واجهة المسح الضوئي القريبة من الأشعة تحت الحمراء.
اضبط معلمات التصوير وابدأ التصوير.
عند إضاءة الليزر ، تنبعث الفلوروفورات الموجودة على مستقبلات AMPA و NMDA من الفلورة.
يقللالتصوير بالأشعة تحت الحمراء القريبة من التألق الذاتي ، مما يعزز وضوح الإشارة.
يضمن المسح عالي الدقة أيضا تمايزا واضحا لإشارات التألق ، مما يتيح التصور الدقيق لمستقبلات AMPA و NMDA القريبة في اللوزة.
باستخدام برنامج التصوير ، احسب نسبة شدة التألق AMPA / NMDA في منطقة معينة ذات أهمية كعلامة على التعلم والذاكرة.
ضع الشرائح على واجهة المسح الضوئي بالأشعة تحت الحمراء القريبة بحيث يكون النسيج متجها لأسفل. صور شرائح متعددة في وقت واحد باستخدام أداة تحديد. قم بتصوير الشرائح باستخدام أعلى إعداد جودة ، بدقة 21 ميكرومتر. ف
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية