موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:56 دقيقة • May 29th, 2025
خذ قسما سهميا من دماغ الفأر لكشف البطينين ، وهما تجاويف مملوءة بالسائل الدماغي النخاعي ، أو السائل النخاعي.
تمتلكالخلايا البطانية البطانية المبطنة للأهداب المتحركة التي تدفع السائل الدماغي النخاعي لتسهيل الدورة الدموية.
ضع القسم في طبق زجاجي يحتوي على وسط غني بالمغذيات للحفاظ على النشاط الهدبي.
انقل الطبق إلى الغرفة التي يتم التحكم فيها بالمناخ لمجهر تباين التداخل التفاضلي ، أو DIC ، للحفاظ على بقاء الخلية أثناء التصوير.
يستخدمالفحص المجهري DIC منشورا لتقسيم الضوء المستقطب ، وتوجيهه عبر العينة على طول مسارات مختلفة.
تؤديالاختلافات في معامل الانكسار عبر العينة إلى اختلافات في الطور بين الحزم.
يعيد المنشور الثاني تجميع الحزم ، مما يخلق تداخلا ينتج صورة عالية التباين مع تأثير ثلاثي الأبعاد ، مما يعزز رؤية الهياكل الدقيقة.
حدد موقع الخلايا البطانية العصبية الوظيفية ذات الأهداب المتحركة من خلال مراقبة حركة الفقاعات الناتجة عن ضربها.
باستخدام تصوير DIC عالي التباين ، سجل الأهداب لتحديد تردد الضرب.
لتصوير الأقسام ، ضع شرائح الدماغ في أطباق ثقافة ذات قاع زجاجي مقاس 30 ملم تحتوي على 1 مليلتر من وسط عالي الجلوكوز ، واضبط بيئة غرفة المجهر المغلقة على 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون ، باستخدام عدسة غمر بالزيت الموضوعية 60x.
بعد ذلك ، ركز على الخلايا ذات الضوء المنقول بشكل منتظم DIC. بعد ذلك ،
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية