تصوير التنشيط الضوئي الفلوري لنقل الخيوط العصبية في محاور الفأر النخاعية

ابدأ بمجموعة التروية الموضوعة على مسرح المجهر المقلوب.

تحتوي مجموعة التروية على عصب محيطي مقطوع مثبت بين غطاء وشريحة قناة صغيرة مع نضح ملحي مستمر.

تعبر المحاور النخاعية للعصب عن الخيوط العصبية الخضراء الموسومة بالفلوروفور.

باستخدام إضاءة المجال الساطع ، ركز على المحاور النخاعي.

قم بالتبديل إلى الوضع متحد البؤر ، والتبييض الضوئي بقوة ليزر عالية ، ثم التقط صورة مرجعية منخفضة التألق الذاتي باستخدام طاقة ليزر منخفضة.

ارسم خطوطا متوازية على طول المحور العصبي لتحديد طول نافذة التنشيط الضوئي. استخدم هذا كدليل لإنشاء منطقة تنشيط مستطيلة.

قم بإضاءة هذه المنطقة بطول موجي محدد لتنشيط الخيوط العصبية ذات العلامات الفلورية الخضراء ، مما يؤدي إلى تألقها. احصل على الصورة.

بعد التنشيط ، التقط صورا بفاصل زمني.

بمرور الوقت ، تتحرك الخيوط العصبية الفلورية في كلا الاتجاهين وتنتشر في المناطق المجاورة المرافقة.

يؤكد ظهور التألق في المناطق المجاورة لمنطقة التنشيط نقل الخيوط العصبية.

أمسك الطرف القريب من العصب وضعه ببطء على زلة غطاء. ثم قم بتصويبها تحت التوتر اللطيف. ضع شريحة القناة الدقيقة فوق العصب مع الانزلاق المحزز لأسفل وضع اتجاه التدفق الموازي للعصب. اقلب زلة الغطاء ومجموعة القناة الصغيرة وضعها في مبيت غرفة التروية مع الشريحة المقابلة للحشية الخارجية.

لتأمين غرفة التروية ، ضعها في الغلاف المعدني وقم بتدوير حلق