موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:43 دقيقة • June 18th, 2025
خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على خلايا جذعية عصبية ملتصقة أو الخلايا الجذعية العصبية المعزولة من دماغ الفأر المعدل وراثيا. تحتوي هذه الخلايا السرطانية على بروتين مميز بالفلورسنت خاص بمرحلة النمو الأول أو G1.
عندما ينقسم NSC ، فإنه يتألق في المرحلة G1 من دورة الخلية بينما لا ينبعث منه أي مضان في مراحل أخرى.
ضع اللوحة في غرفة تصوير مجهر المسح الضوئي بالليزر متحد البؤر ، ويتم الحفاظ عليها في درجة حرارة مضبوطة.
حدد العدسة الموضوعية المطلوبة واضبط شدة التألق.
قم بتكوين معلمات التصوير بفاصل زمني.
اختر خيار الصورة الكبيرة وجدولة الحصول على الصور على فترات منتظمة للمدة المطلوبة.
استخدم ماسحا ضوئيا عالي السرعة للرنين لتجنب التبييض الضوئي والحفاظ على الدقة العالية.
استخدم إعداد المجال الساطع لتصور شكل الخلية ، واستخدم مرشح فلورسنت مناسب لالتقاط الفلورة.
ابدأ التصوير بفاصل زمني ل NSC لتصور مراحل دورة الخلية المختلفة.
قم بإعداد مجهر مسح ضوئي بالليزر متحد البؤر للتصوير عن طريق التسخين المسبق لغرفة التحكم في درجة الحرارة المرفقة إلى 37 درجة مئوية تحت جو من ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5٪. ضع اللوحة المكونة من 96 بئرا داخل غرفة المجهر الدافئة مسبقا واجعل البئر الأول في بؤرة التركيز. بعد ذلك ، افتح برنامج التصوير وانقر بزر الماوس الأيمن في النافذة الرئيسية لتحديد اكتساب عناصر التحكم وإلغاء الاستحواذ لفتح لوحة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية