توصيف الخواص الميكانيكية لأنسجة دماغ الفئران باستخدام مجهر القوة الذرية

خذ طبقا مغطى بمادة لاصقة حيوية مع شريحة دماغ فأر ثابتة في وسط دافئ مسبقا.

ضعه على مجهر القوة الذرية الدافئ مسبقا أو مرحلة AFM للحفاظ على الظروف الفسيولوجية.

ضع قطرة من الوسط على الخرزة الكروية لناتئ AFM الموضوعة فوق رأس AFM.

بعد ذلك ، قم بتغيير موضع رأس AFM وغمره في الوسط.

قم بمحاذاة شعاع الليزر على الكابول لتتبع انحراف الكابولي باستخدام الصمام الثنائي الضوئي.

اخفض مسبار AFM حتى يلامس سطح أنسجة المخ.

لقياس الامتثال للزحف ، قم ببرمجة مسبار AFM لتطبيق قوة ثابتة.

تتسبب هذه القوة في تشوه الأنسجة أثناء ثني الكابولي. يكتشف الليزر الانحناء الكابولي

ويقيس تصلب الأنسجة.

لقياس استرخاء القوة ، قم بوضع مسافة بادئة للأنسجة على عمق ثابت والحفاظ عليها.

يتتبع الليزر الانحناء الكابولي لقياس مقاومة الأنسجة والاسترخاء بمرور الوقت ، مما يتيح تقييما دقيقا للخصائص الميكانيكية للأنسجة.

قم بتحميل مسبار AFM بعناية بثابت زنبركي اسمي يبلغ 0.03 نيوتن لكل متر وحبة بورسليكات قطرها 20 ميكرومتر في حامل المسبار. ضع شريحة دماغية مثبتة في طبق بتري على سخان AFM مثبت على المسرح تم تسخينه مسبقا إلى 37 درجة مئوية.

ثم أضف حوالي 2 مل من الوسط الدافئ مسبقا.

بعد ذلك ، أضف قطرة من الوسط بعناية إلى مسبار AFM لحمايته من الانكسار بسبب التوتر السطحي عند إنزاله في الوسط المحيط بشريحة الدماغ. بعد ذلك ، أعد وضع رأس AFM على المسرح. وابدأ في خفض الرأس حتى يغمر في الوسط.

باستخدام المجهر البصري ، حرك المرحلة بحيث تكون منطقة الاهتمام أسفل مسبار AFM المعاير. بعد ذلك ، قم بخفض مسبار AFM للتلامس مع سطح الأنسجة. من أجل إجراء تجارب الامتثال للزحف ، قم بإنشاء وظيفة قوة مطبقة في محرر وظائف البرنامج.

تتكون الوظيفة من منحدر 0.1 ثانية إلى 0.05 نانونيوتن ، والذي يتم الاحتفاظ به لمدة 20 ثانية ، متبوعا بمنحدر 1 ثانية وصولا إلى 0 نانونيوتن. سيقوم البرنامج بتسجيل البيانات الموجودة على المسافة البادئة لمجسات AFM في الأنسجة أثناء وظيفة القوة المطبقة. بعد تشغيل تجربة الامتثال للزحف ، قم بإجراء تجارب استرخاء القوة عن طريق إنشاء وظيفة مسافة بادئة مطبقة في البرنامج. قم بتشغيل هذه الوظيفة بينما يقوم البرنامج بجمع البيانات حول القوة التي يتعرض لها مسبار AFM أثناء دخوله في الأنسجة.