موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:15 دقيقة • June 17th, 2025
ابدئي بمصنع شبكية الفأر الحي بعد الولادة مركب على مرشح غشائي ويوضع في غرفة حضانة تحت مجهر متحد البؤر.
يتم نقل شبكية العين للتعبير عن بروتين فلوري في أغشية الخلايا العصبية الداخلية النجمية الآكرينية.
ضع وزن عينة مبلل مسبقا على شبكية العين لتثبيتها.
املأ الغرفة بالعازلة.
الحفاظ على التدفق العازل الأمثل ودرجة الحرارة في الغرفة للحفاظ على حيوية الخلايا العصبية.
ضع هدف الغمر في الماء في غرفة التصوير.
ابدأ التصوير باللسان العرضي.
يثير ضوء الليزر ، الموجه من خلال الهدف ، البروتين الفلوري في خلايا amacrine.
يتم التقاط التألق المنبعث من خلال نفس الهدف ، مما يسمح بتصور خلايا amacrine المسماة.
تحديد خلية الفلورسنت الساطعة للتصوير.
قم بتعيين معلمات التصوير.
التقط صورا على مستويات Z متعددة لتحقيق تصور ثلاثي الأبعاد لمورفولوجيا التغصنات الكاملة.
قم بإجراء تصوير بفاصل زمني لتتبع التغيرات في مورفولوجيا التغصنات بمرور الوقت.
قم بتجميع غرفة حضانة التصوير الحي واملأها ب aCSF المؤكسج. قم بتشغيل المضخة وجهاز التحكم في درجة الحرارة ، وتأكد من عدم ارتفاع درجة الحرارة عن 34 درجة مئوية. قد يستغرق استقرار درجة حرارة الغرفة ما يصل إلى ساعة. يوصى بإعداد غرفة الحضانة قبل البدء في تشريح الشبكية. تساعد درجة حرارة الغرفة المستقرة على تقليل انجراف العينة.
لنقل كومة الشبكية المسطحة إلى غرفة التروية ، أوقف المضخة ، وقم بإزالة aC
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية