تصور الشبكات العصبية والأوعية الدموية في جنين الدجاج

ابدأ ببيضة دجاج مخصبة ذات نوافذ تحتوي على جنين في مرحلة مبكرة مع استئصال الأنبوب العصبي عند مستوى الجسيدات من واحد إلى سبعة.

خذ أنبوبا عصبيا من متبرع يحمل علامة GFP من جنين دجاج معدل وراثيا متطابق مع المرحلة وزرعه في المتلقي ، مما يضمن التوجيه التشريحي المناسب.

قم بإزالة السائل الزائد حول الكسب غير المشروع لتعزيز الالتصاق بين المتبرع والأنسجة المضيفة.

أغلق النافذة بشريط شفاف لمنع الجفاف والتلوث.

احتضان البويضة حتى يتطور الجنين إلى المرحلة المرغوبة.

قم بإزالة الشريط.

حدد الوريد الزجاجي على صفار البيض الذي يحمل الدم نحو الجنين وقم بإزالة الغشاء الزجاجي العلوي.

باستخدام إبرة زجاجية ، قم بحقن صبغة فلورية محبة للدهون في الوريد بثبات.

تصور الجنين تحت المجهر التجسيم.

ترتبط الصبغة المحقونة بالخلايا البطانية المبطنة للأوعية الدموية ، مما يسلط الضوء على شبكة الأوعية الدموية ، بينما يتيح الأنبوب العصبي المسمى GFP تتبع الشبكة العصبية.

عندما تكون جاهزا لبدء إجراء التطعيم ، انقل الأنبوب العصبي المقطوع بعناية من زجاج الساعة إلى الجنين المضيف. ضع الأنبوب العصبي في الاتجاه الصحيح. وادفع المصنع المجاور برفق إلى المنطقة المستقطأة. إذا لزم الأمر ، استخدم المشرط الدقيق لتقليم المصباح المخرج إلى الحجم الدقيق للمنطقة المستقاصة.

بمجرد الوصول إلى الموضع الصحيح ، قم بإزالة PBS والسوائل الأخرى لمساعدة المتبرع والأنسجة