توصيل الخلايا الجذعية الوسيطة داخل الأنف في نموذج فأر لإصابات الدماغ الرضحية

ابدأ بفأر مخدر مصاب بإصابة دماغية مؤلمة.

في موقع الإصابة ، يؤدي إزالة الميالين المحوري والتلف العصبي إلى إطلاق السيتوكينات المؤيدة للالتهابات.

قم بتأمين الماوس وقم بتوصيل إنزيم محلل للبروتين داخل الأنف.

بعد ذلك ، ضع الماوس ووجهه لأعلى لفترة قصيرة وكرر توصيل الإنزيم.

الإنزيمات المحللة للبروتين على تدهور المصفوفة خارج الخلية في ظهارة الأنف وتعزز نفاذية الخلية.

بعد ذلك ، قم بإدارة الخلية الجذعية الوسيطة المسمى أو محلول MSC عن طريق الأنف.

امسك رأس الفأر في وضع مستقيم لفترة من الوقت لمنع التصريف المبكر والسماح بامتصاص MSC في أنسجة الأنف.

كرر عملية تسليم MSC.

اسمح للماوس بالتعافي.

توجه الإشارات الكيميائية للسيتوكينات المؤيدة للالتهابات الخلايا الجذعية الجذعية للهجرة من تجويف الأنف إلى موقع إصابة الدماغ.

في موقع الإصابة ، تفرز الخلايا الجذعية الجذعية العوامل العصبية التي تعزز إعادة تكوين الميالين. هذا يسلط الضوء على إمكانات العلاج العصبي للخلايا الجذعية لإصلاح الخلايا العصبية.

لتوصيل الخلايا ، بعد التأكد من عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم ، قم بتقطيع الفأر أثناء شل حركة الجمجمة. ضع طرف ماصة تحتوي على 4 وحدات من الهيالورونيداز لكل ميكرولتر من PBS بالقرب من نصف الفأر بزاوية 45 درجة وقم بإعطاء 3 ميكرولترات من تعليق الهيالورونيداز في كل فتحة أنف. ضع ووجهه لأعلى على وسادة نظيفة لمدة خمس دقائق قبل تكرار العلاج أربع مرات ليصبح المجموع 100 وحدة من علاج الهيالورونيداز.

بعد العلاج الأخير ، ضع الماوس مرة أخرى على اللوحة لمدة 30 دقيقة قبل تقييد الماوس ، كما هو موضح للتو. مع تثبيت الرأس ، قم بإدارة 3 ميكرولترات من تعليق الخلايا الجذعية الوسيطة في كل فتحة أنف على مدى ثلاث ثوان لكل تسليم محلول ، مع الاحتفاظ بالماوس في موضعه لمدة 30 ثانية حتى تختفي قطرات العينة تماما. بعد دقيقتين ، كرر التسليم حتى ثلاث مرات حتى يتم تسليم الحجم الكامل للخلايا الجذعية الوسيطة. ثم أعد الماوس إلى قفصه مع المراقبة حتى الاستلقاء الكامل.