موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:29 دقيقة • August 7th, 2025
خذ فأرا مخدرا مع إدخال خيوط أحادية في الشريان الدماغي الأوسط للحث على الانسداد.
هذا يمنع تدفق الدم إلى الدماغ، مما يؤدي إلى نقص التروية البؤري.
يحد الانسداد من إمداد الأكسجين والجلوكوز ، مما يتسبب في استنفاد ATP وإزالة الاستقطاب العصبي.
تطلق الخلايا العصبية غير المستقطبة الغلوتامات الزائدة ، والتي ترتبط بمستقبلات ما بعد المشبك ، مما يتسبب في تدفق هائل للكالسيوم.
يؤديارتفاع الكالسيوم داخل الخلايا إلى تعطيل وظيفة الميتوكوندريا ويعزز إنتاج أنواع التفاعلات التفاعلية ، مما يؤدي إلى تلف الخلايا العصبية.
أعد تخدير الفأر.
أعد فتح الشق وإزالة الشعيرات الأحادية لتحقيق إعادة التروية.
تؤدي إعادة إدخال الأكسجين المفاجئة إلى زيادة ROS من الميتوكوندريا المختلة ، مما يؤدي إلى تفاقم إصابة الخلايا العصبية.
للتخفيف من ذلك ، قم بتعريض الفأر لخليط غاز ثاني أكسيد الكربون عالي التكييف الحمضي أو APC بعد بدء إعادة التروية.
وهذا يزيد من تركيز البروتون في الدماغ, تثبيط المستقبلات, الحد من تدفق الكالسيوم ومنع السمية المثيرة بوساطة الكالسيوم.
بالإضافة إلى ذلك ، يعمل APC على استقرار الميتوكوندريا وتمنع إنتاج ROS ، وبالتالي توفير الحماية العصبية.
بعد 55 دقيقة من بدء الانسداد ، أعد تخدير بالأيزوفلوران وضع كما كان من قبل. ثم افتح شق الرقبة وأعد كشف الشريان السباتي المشترك. بعد فترة الانسداد ، استخدم ملقط العين لسحب الفتيل برفق لتحقيق إعادة التروية. ثم قم بتحويل الخيط المؤقت إلى خياطة دائمة عن طريق شد العقدة. لعلاج الحماض ، قم بتغيير الغاز الذي يستنشقه مخروط الأنف إلى 20٪ ثاني أكسيد الكربون و 20٪ أكسجين و 60٪ نيتروجين لمدة خمس دقائق. بعد إغلاق الشق بخياطة جراحية متقطعة ، ضع الفأر في قفص ساخن بدرجة حرارة 30 درجة مئوية حتى يستعيد الفأر وعيه.