توصيل الحمض النووي الريبي داخل الأنف إلى دماغ الفأر باستخدام جهاز تحديد المواقع

ابدأ بالفئران المخدرة الموضوعة على جهاز تحديد المواقع مع ظهورها موازية للدعامة الخلفية للكرسي وعمودية على المقعد.

يتم وضع الفئران في وضع الرأس لأسفل وللأمام ويتم تأمينها باستخدام أحزمة الكرسي.

باستخدام ماصة دقيقة محملة بمركب الببتيد siRNA الذي يستهدف الخلايا العصبية ، ضع قطرة بالقرب من فتحة أنف واحدة ، مما يسمح للفأر باستنشاق المحلول بشكل طبيعي.

اضغط برفق على رأس الفأر لأسفل أثناء الاستنشاق لمنع المحلول من التصريف إلى الرئتين.

توقف لفترة وجيزة ، ثم كرر الإعطاء في فتحة الأنف الأخرى.

كرر الإجراء مع الفئران المتبقية.

يخترق المركب الغشاء المخاطي للأنف ، حيث يدخل الأعصاب الشمية وثلاثية التوائم وينتقل عبرها للوصول إلى الدماغ.

داخل الدماغ ، يرتبط المركب بالمستقبلات العصبية ، ويخضع للالتقام الخلوي ، ويسهل توصيل الحمض النووي الريبي داخل الخلايا.

يصبح siRNA جزءا من مركب RISC ، والذي ، عند الارتباط ب mRNA المستهدف ، يؤدي إلى إسكات الجينات.

لبدء هذا الإجراء ، قم بتقييم مستوى تخدير منعكس الفئران على قدمين من أجل الحفاظ على المستوى الجراحي. بعد ذلك ، ضع جهاز تحديد المواقع على مسافة وارتفاع مناسبين للسماح بالوصول المريح إلى جميع الكواشف المطلوبة.

ثم ضع مرهما على عيون. اربط فأرة واحدة بأحزمة كرسي ، مع التأكد من أن الأطراف الأمامية للماوس توفر دعما طبيعيا أثناء وجوده في وضع مريح دون أي إزعاج. كرر الإجراءات