JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 2:25 د • August 7th, 2025
خذ حاقن دقيق بإبرة دقيقة تحتوي على ناقل فيروسي عالي الكفاءة أو ناقل فيروسي HiRet.
تسهل البروتينات السكرية الموجودة في غلاف فيروس HiRet دخولها إلى الخلايا العصبية عبر نقاط الاشتباك العصبي. يحمل الفيروس أيضا جينا يشفر بروتين الفلورسنت.
خذ فأرا مخدرا مع حبل شوكي قطني مكشوف من 1 إلى 4.
باستخدام خط الوسط للحبل الشوكي كمرجع ، ضع الإبرة فوق موقع الحقن.
اخفض الإبرة في الحبل الشوكي.
ابدأ في إعطاء الفيروس بمعدل متحكم فيه.
اترك وقتا كافيا لانتشار الفيروس قبل سحب الإبرة.
ترتبط المستقبلات العصبية بالبروتينات السكرية الفيروسية ، مما يسهل دخول الفيروس عبر المشبك ونقله عبر المحور العصبي إلى السوما ، وهي عملية تسمى النقل الرجعي.
يتكامل الجين الفيروسي مع الجينوم المضيف ، مما يتيح التعبير عن البروتينات الفلورية.
تنتقل هذه الفيروسات أيضا عبر الخلايا العصبية المتصلة ، مما يتيح تتبع المسارات العصبية.
ضع الإبرة في خط الوسط للحبل الشوكي واستخدم مقياس Vernier على أداة المعالجة الدقيقة لتوجيه الإبرة بشكل جانبي 0.8 ملم. ثم اخفض الإبرة إلى الحبل الشوكي حتى تدور المسافة البادئة ، ولكن لا تثقب الجافة. واستخدم حركة التواء سريعة لثقب الجافية بالإبرة حتى يغرق طرف الإبرة على عمق 1.5 ملم.
بمجرد وضع الإبرة في مكانها ، قم ببرمجة الحاقن لتوصيل الفيروس بمعدل 400 نانو لتر في الدقيقة وتأكد من دخول الفيروس إلى النخاع الشوكي من خلال مراقبة تقدم واجهة الصبغة. بمجرد الانتهاء من الحقن ، اترك الإبرة ترتاح في الحبل الشوكي لمدة دقيقتين إلى خمس دقائق لتسهيل انتشار الفيروس ، قبل سحب الإبرة ببطء لوضعها في موقع الحقن التالي.