JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 7:04 د • August 7th, 2025
ابدأ بفأر مخدر مصاب بالسكري بعصب وركي مكشوف ينقل الألم يحتوي على أقطاب كهربائية محفزة مزروعة مسبقا. يرتبط العصب الوركي بالعضلة المعدية ، حيث يتم وضع أقطاب التسجيل.
ارفع العصب الوركي وضع الموجات فوق الصوتية المركزة عالية الكثافة أو قاعدة مثبت HIFU تحته.
باستخدام موصل ، قم بتأمين العصب في فتحة المثبت وقم بتوصيل محول الطاقة HIFU فوقه.
املأ البئر المركزي للمثبت بمحلول اقتران منزوع الغازات للانتشار بالموجات فوق الصوتية.
توصيل حافز كهربائي من خلال الأقطاب الكهربائية المحفزة لتحفيز إمكانات عمل الأعصاب التي تنتقل إلى العضلات.
سجل إشارة العضلات الأساسية هذه.
أثناء الاستمرار في التسجيل ، قم بتوجيه شعاع HIFU عبر محول الطاقة إلى العصب.
يحفز HIFU الإجهاد الميكانيكي ويزيد من درجة الحرارة التي تمنع بشكل عابر انتشار جهد الفعل إلى العضلات وتقلل من الإشارة.
يرتبط هذا بإدراك الألم المتناقص ، مما يدل على قدرة HIFU على تخفيف آلام الاعتلال العصبي السكري.
بعد خمسة أسابيع من حقن STZ ، بعد تخدير الفئران وإجراء قرصة من السطح الأخمصي للقدم وفقا لبروتوكول النص ، استخدم ماكينة قص كهربائية لإزالة الشعر من الفخذ وأسفل الظهر. ضع اليود السائل على الجلد في موقع الجراحة. ثم استخدم ضمادة كحولية لمسح اليود السائل.
باستخدام مشرط معقم ، قم بعمل شق في الجلد في الفخذ الظهري. استخدم مقصا جراحيا لنشر الأنسجة تحت الجلد. واستخدم خطافات الجلد لتأمين الجلد.
باستخدام المقص ، افصل بعناية العضلات الموازية لعظم الفخذ حتى تظهر الألياف العصبية الوركي في منتصف الفخذ المضمنة في العضلات. استخدم خطافا زجاجيا بعناية لفصل العصب الوركي في منتصف الفخذ عن النسيج الضام والعضلات المحيطة. ثم لوضع العصب الوركي في الموجات فوق الصوتية المركزة عالية الكثافة أو المنطقة البؤرية HIFU باستخدام مثبت عصبي مخصص ، استخدم خطافا زجاجيا لرفع العصب بعناية. ووضعه في فتحة المكون 1 من الجهاز.
بعد ذلك ، قم بربط المكون 2 إلى المكون 1. ثم استخدم محلول Ringer لملء البئر المركزي للمكون 1 للانتشار بالموجات فوق الصوتية والحفاظ على الأعصاب. برغي المكون 3 إلى مخروط الإسكان HIFU. ثم من خلال الأرجل الأربعة للمكون 2 ، قم بربط مكون الرصيف 3 مع المكون 2.
بعد إدخال زوج واحد من إبر الوخز بالإبر في أصل العصب الوركي والزوج الآخر في عضلة المعدة ، قم بتوصيل كل زوج من الإبر بنظام اكتساب الفيزيولوجيا الكهربية من خلال كابل متحد المحور الكهربائي. اضبط معدل أخذ العينات وعرض النطاق الترددي لنظام اكتساب الفيزيولوجيا الكهربية على 50 كيلو هرتز و 70 هرتز ، 3 كيلو هرتز ، على التوالي. ثم عند أصل العصب الوركي ، قم بتطبيق حافز فوق الحد الأقصى بعرض نبضة يبلغ 0.1 مللي ثانية على الأقطاب الكهربائية المحفزة. في نظام اكتساب الفيزيولوجيا الكهربية ، سجل إمكانات عمل العضلات المركبة أو CMAPs من أقطاب التسجيل. وقم بتضخيم CMAPs باستخدام مكبر الصوت المدمج.
لاستخدام محول HIFU تجاري 2.68 مللي هرتز لقمع CMAPs في الفئران المصابة بالاعتلال العصبي السكري ، اغمر المخروط الكروي ، ومحول HIFU ، والغطاء المخروطي في الخزان المملوء بالماء منزوع الغاز. ضع محول الطاقة HIFU في المخروط الكروي. واستخدم ستة براغي رأس لتثبيت الغطاء المخروطي في الفتحة العلوية للمخروط الكروي.
بعد طرد الفقاعات الموجودة في المخروط الكروي بشكل طبيعي بسبب انخفاض كثافة الفقاعات مقارنة بالماء ، استخدم شريطا شفافا بسمك 0.03 ملم لإغلاق الفتحة الأمامية للمخروط. ثم قم بربط المكون 3 على المخروط الكروي. وقم بإزالة محول الطاقة HIFU مع المخروط الكروي والمكون 3 من خزان المياه منزوع الغاز.
أدخل المكون 1 بعناية في الفراغ بين العصب والعضلة. ووضع العصب في فجوة المكون 1. للتأكد من أن العصب داخل بؤرة HIFU ، كما هو موضح سابقا ، قم بربط المكون 2 إلى المكون 1. بعد شد المكون 3 إلى مخروط الإسكان HIFU ، من خلال الأرجل الأربعة للمكون 2 ، مكون قفص الاتهام 3 مع المكون 2 واستخدام حل Ringer لملء البئر المركزي للمكون 1 للانتشار بالموجات فوق الصوتية والحفاظ على الأعصاب.
اربط مولد دالة ومضخم طاقة تردد لاسلكي. قم بتوصيل مضخم الطاقة بمحول الطاقة HIFU لتوليد شعاع HIFU. ثم اضبط يدويا خرج الجهد لمولد الوظيفة على محول الطاقة HIFU عبر مضخم الطاقة. واضبط مؤقتا لقياس وقت التعرض ل HIFU.
قم بإيقاف تشغيل مولد الوظائف يدويا بمجرد انتهاء وقت التعرض ل HIFU. قم بتوصيل الحافز في نفس الوقت عبر نظام اكتساب الفيزيولوجيا الكهربية وشعاع HIFU عبر نظام HIFU إلى العصب الوركي أثناء تسجيل CMAPs. قم بزيادة التعرض ل HIFU تدريجيا على العصب الوركي من 3 ثوان و 5 ثوان ثم إلى 8 ثوان حتى يتم ملاحظة انخفاض أو تثبيط سعة CMAPs.
سجل CMAPs مرة واحدة في الثانية أثناء تسليم شعاع HIFU. بعد ملاحظة التغيير في سعة CMAPs ، قم بإيقاف تشغيل نظام HIFU. وانقر يدويا على أيقونة التسجيل في برنامج اكتساب الفيزيولوجيا الكهربية لتسجيل CMAPs لمدة ساعتين. بعد إزالة مكونات مثبت الأعصاب ، وخياطة الموقع الجراحي للفأر المصاب بالسكري ، والسماح للفئران بالتعافي في الأيام 7 و 14 و 28 بعد صوتنة HIFU الأولية ، أدخل أقطاب كهربائية محفزة وتسجيل في فئران الاعتلال العصبي السكري المخدرة كما كان من قبل. وسجل CMAP إضافية.