زرع خلايا السلائف بين الخلايا العصبية في دماغ جرو الفأر

ابدأ بجرو فأر متلقي مخدر. قم بتأمين رأسه بشريط لاصق ، مع التأكد من بقاء الجمجمة مكشوفة.

استخدم لامدا المرجعي التشريحي لتحديد منطقة الدماغ المستهدفة.

ضع ماصة دقيقة فوق المنطقة المستهدفة، محملة بتعليق من الخلايا السليفة العصبية الداخلية القادرة على التمايز إلى خلايا عصبية داخلية ناضجة.

تشتق هذه الخلايا السلائف من القشرة أو المخطط أو الحصين لجرو متبرع في نفس مرحلة نمو المتلقي.

حقن المعلق في الدماغ لإجراء عملية زرع متجانسة ، حيث يتم تسليم السلائف إلى منطقتها الأصلية ، أو زرع غير متجانس ، حيث يتم إدخالها إلى منطقة مختلفة من الدماغ.

اترك المعلق ينتشر قبل سحب الماصة الدقيقة لمنع التدفق العكسي.

انقل الجرو إلى وسادة تسخين للتعافي.

يمكن الآن تقييم بقاء ونضج السلائف المانحة في دماغ الجرو المتلقي.

قم بتحميل ماصة دقيقة بالزيت المعدني. قم بتوصيل الماصة الدقيقة بحاقن نانولتر ، وقم بتأمين جهاز حقن النانو لتر بمناور متصل بقاعدة مغناطيسية. أثناء تخدير الجرو الأول على الجليد ، قم بتقطيع محلول الخلية عدة مرات لضمان توزيع الخلايا المتجانس.

أخرج الزيت المعدني واملأ الماصة بالكامل بتعليق الخلية الواحدة. بعد التأكد من عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم ، ضع الجرو على غطاء طبق بتري مع وضع الرأس على معجون لاصق بحيث يكون الجزء العلوي من الرأس مسطحا نسبيا.

قم بتغطية الرأس بقطعة من شريط المختبر بفتحة ماسية ، واسحب الشريط مشدودا حتى يتمدد الجلد بحيث يتم تأمين الرأس بإحكام ويكون لامدا مرئيا من خلال الفتحة. حرك الجرو الآمن أسفل حاقن النانولتر وقم بخفض الماصة الدقيقة بحيث يكون الطرف فوق لامدا مباشرة.

راقب إحداثيات x و y على المناور واضبط مقابض المناور حتى يتم وضع الماصة الدقيقة عند الإحداثيات المناسبة على طول المحاور المتوسطة والأمامية الخلفية للرأس. اخفض الماصة الدقيقة حتى يخلق الطرف تقتقرا صغيرا على الجلد ، وأدر مقبض مناور المحور z بإحكام ولكن برفق لدفع الماصة الدقيقة عبر الجلد والجمجمة إلى الدماغ.

اسحب الماصة الدقيقة قليلا حتى يحيط بطرفها مخروط من الجلد على شكل خيمة واعرض الإحداثيات على طول المحور z. ثم اخفض الماصة الدقيقة إلى العمق التجريبي المناسب وحقن الخلايا. انتظر 15 ثانية بعد تسليم الخلايا قبل سحب الماصة الدقيقة وكرر الحقن في مكان ثان إذا رغبت في ذلك. ضع الجرو على وسادة تدفئة وراقبه حتى يتحقق الشفاء التام قبل نقله مرة أخرى إلى قفص المنزل.