موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:33 دقيقة • June 17th, 2025
املأ حقنة بمحلول يحتوي على فيروسات مرتبطة بالغدة ، أو AAV ، والليدوكائين ، وهو مخدر موضعي.
ضع الفأر المستيقظ في وضع الانبطاح وقم بتغطية الجزء العلوي من جسمه.
أمسك حزام حوض الفأر واحلق أسفل ظهره لكشف الجلد. تعقيمه باليود والإيثانول.
حدد موقع الفجوة في أسفل العمود الفقري واضغط برفق لتمييزها.
قم بتدوير الذيل لمحاذاة العمود الفقري وإدخال المحقنة عموديا.
اضبط الزاوية حتى تحدث نفض الغبار في الذيل، لتأكيد دخول الإبرة إلى الفراغ داخل القراب حيث يتدفق السائل الدماغي النخاعي أو السائل النخاعي.
حقن المحلول ببطء للتوزيع المتساوي.
ترتبط الجسيمات الفيروسية بالخلايا العصبية ، وتدخل إلى الداخل ، وتطلق مادتها الوراثية في النواة ، مما يتيح التعبير الجيني المستهدف.
يحجب الليدوكائين الإشارات العصبية مؤقتا ، مما يتسبب في شلل الساق على المدى القصير ، مما يؤكد الولادة الناجحة في السائل الدماغي النخاعي.
يحدد هذا البروتوكول التوصيل داخل القراب كطريقة فعالة لعلاج أمراض الجهاز العصبي المركزي.
قبل البدء في الإجراء ، قم بتوصيل إبرة قياس 27 بحقنة هاميلتون سعة 25 ميكرولتر وقم بمحاذاة الطرف المشطوف للإبرة مع المقياس الحجمي على المحقنة ، ثم قم بتحميل 8 ميكرولتر بعناية من 4 مرات 10 إلى نسخ الجينوم العاشرة من محلول الفيروس في المحقنة ، مع الحرص على تجنب الفقاعات.
بعد ذلك ، ضع فأرا مستيقظا يبلغ من العمر 30 إلى 70 يوما ، من 12
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية