موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:16 دقيقة • June 17th, 2025
خذ قسما من دماغ الفأر الملطخ بالمناعة مع الخلايا النجمية المصنفة بالفلورسنت. يتألق سيتوبلازم الخلية النجمية باللون الأحمر ، بينما تتألق النواة باللون الأزرق.
ضع الشريحة على مسرح المجهر متحد البؤر تحت عدسة موضوعية مناسبة.
باستخدام برنامج الاستحواذ ، اضبط التركيز وحدد الفلوروفورات التي تضع علامة على سيتوبلازم الخلية النجمية والنواة.
ابدأ التصوير المباشر وحسن معلمات التصوير لتقليل التشويش في الصورة المكتسبة.
ضمن معلمات الاكتساب ، حدد وضع مسح ضوئي منخفض السرعة لالتقاط صورة ثنائية الأبعاد عالية الجودة.
حدد الموضع العلوي للخلية النجمية كنقطة بداية للمكدس Z وأدنى موضع كنقطة نهاية.
حدد عدد الشرائح التي تغطي عمق الخلية الكامل.
ادمج الشرائح لإنشاء صورة ثلاثية الأبعاد للخلية النجمية.
لبدء الفحص المجهري متحد البؤر ، ضع شريحة على مرحلة المجهر وحدد هدف 63x. بعد فتح برنامج الاستحواذ ، انقر فوق الإعداد الذكي في علامة التبويب Acquisition وحدد الفلوروفورات المناسبة. هنا ، يتم استخدام DAPI و Alexa Fluor 555.
بعد ذلك ، انقر فوق أفضل إشارة ، متبوعا بتطبيق. ثم انقر فوق تعيين التعرض للسماح للكمبيوتر بتحديد معلمات التعريض الضوئي المثلى.
لتحسين الصورة ، افتح نافذة القنوات وقم بتبديل الصورة إلى مباشر. اضبط التركيز إذا لزم الأمر. ثم انقر فوق 1 AU لتحسين الثقب. اضبط الكسب للحصول على أفضل كثافة.
أخيرا ، قم بتعيين الكسب
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية