حقن النواقل المؤتلفة المرتبطة بالغدة في نموذج فأر ضمور عضلي في العمود الفقري والبصلي

ابدأ بضمور عضلي مقيد في العمود الفقري والبصلي أو فأر متأثر ب SBMA.

نظف ذيله وقم بتسخينه لتوسيع الوريد.

SBMA ناتج عن مستقبلات الاندروجين المتحولة أو جين AR الذي ينتج AR mRNA المتحور.

يقوم هذا الحمض النووي الريبي المرسال بتصنيع البروتينات السامة في الخلايا العصبية الحركية التي تضعف نقل الإشارات وتؤدي إلى ضعف العضلات.

بعد ذلك ، خذ حقنة تحتوي على فيروس مؤتلف مرتبط بالغدة أو نواقل AAV مع بلازميد يشفر microRNA العلاجي.

أدخل الإبرة في وريد الذيل وحقن المحلول.

الآن ، اضغط لوقف النزيف ، ثم أعد الفأر إلى قفصه.

بمجرد دخوله الدورة الدموية ، يصل الناقل الفيروسي إلى الخلايا العصبية الحركية التي تتحكم في وظيفة العضلات.

يدخل الفيروس الخلية عن طريق الالتقام الخلوي ، ويطلق البلازميد.

ينتج البلازميد microRNA ناضجا مع تسلسلات تكميلية ل AR mRNA المتحور.

ترتبط هذه الحمض النووي الريبي الصغير ب AR mRNAs ، مما يؤدي إلى تدهورها.

هذا يمنع تراكم البروتين السام ويساعد على تحسين الوظيفة العصبية العضلية.

قسم مخزون بلازميد AAV microRNA إلى 100 إلى 200 ميكرولتر ، تحتوي على حمولة فيروسية من 10 إلى 100 تريليون جينوم لكل مليلتر. بعد ذلك ، قم بتحميل كمية واحدة في حقنة وقم بإرفاق إبرة قياس 27 إلى 30.

الآن ، باستخدام جهاز تقييد الماوس القياسي ، قم بتأمين الماوس مع تعرض ذيله. ثم نظف الذيل بالكحول بنسبة 70٪ وضع وسادة دافئة تحت الذيل لمدة 30 ثانية لزيادة توسع الأوعية. الآن ، في الجزء البعيد من الذيل ، أدخل الإبرة في وريد الذيل مع وضع الشطبة لأعلى وبزاوية ضحلة ، حوالي 15 درجة.

ثم حقن الفيروس وانتظر بضع ثوان قبل إزالة الإبرة. بعد إزالة الإبرة ، استخدم ضغطا معتدلا باستخدام إصبعين لوقف أي نزيف. ثم أعد إلى قفص منزله.