صياغة نظام ناقل للإكسوسوم المحمل بالدوبامين

ابدأ بأنبوب يحتوي على تعليق من الإكسوسومات ، وهي حويصلات نانوية خارج الخلية قائمة على الدهون.

أضف محلول ملحي مخزن بالفوسفات أو PBS إلى الأنبوب للحصول على تشتت إكسوسوم موحد.

استنشق محلول الإكسوسوم وقم بتصفيته باستخدام مرشح غشائي لإزالة الملوثات المتبقية.

انقل تعليق الإكسوسوم المفلتر هذا إلى أنبوب جديد.

أضف محلولا يحتوي على الدوبامين ، وهو عامل علاجي عصبي ، متبوعا بالصابونين ، وهو مادة خافضة للتوتر السطحي ، إلى تعليق الإكسوزوم.

احتضان الخليط في درجة حرارة فسيولوجية لتعزيز نفاذية الغشاء الخارجي الخارجي.

يزيل الصابونين بشكل انتقائي الكوليسترول المرتبط بالغشاء من غشاء الإكسوسوم ، مما يخلق مساما في الطبقات الدهنية الخارجية الثنائية.

ينتشر الدوبامين من خلال هذه المسام في الإكسوسومات.

بمرور الوقت ، تعيد الدهون في الغشاء الخارجي التوزيع ، وتغلق المسام ، مما يؤدي إلى تغليف الدوبامين داخل الإكسوسومات.

بعد ذلك ، قم بالطرد المركزي الفائق لمحلول الخليط لحبيبات الإكسوسومات المحملة بالدوبامين.

قم بإزالة المادة الطافية التي تحتوي على الدوبامين والصابونين الحر.

الحبيبات التي تحتوي على الإكسوسومات المحملة بالدوبامين جاهزة لمزيد من الدراسات.

أضف 3 ملليلتر من PBS إلى تعليق الإكسوسوم الذي تم جمعه سابقا عن طريق الطرد المركزي الفائق ، وقم بتعقيم التعليق المخفف عن طريق الترشيح باستخدام مرشح 0.22 ميكرون.

ثم انقل 500 ميكرولتر من تعليق الإكسوسوم المعقم إلى أنبوب آخر.

بعد ذلك ، أضف بالتتابع 500 ميكرولتر من 0.5 ملليغرام لكل مليلتر من محلول الدوبامين والصابونين في المعلق المعقم. بعد الحضانة ، جهاز الطرد المركزي الفائق التعليق.