الحث البصري الوراثي للاكتئاب طويل الأمد لقمع سلوك البحث عن المخدرات في الفئران

ابدأ بفأر مزروع جراحيا بألياف ضوئية تستهدف نقاط الاشتباك العصبي بين الخلايا العصبية للنواة الركبية الإنسية (MGN) واللوزة الصلوزية الجانبية (LA).

يتم تكييف الجرذ للضغط على رافعة لتلقي مخدر من خلال قسطرة ، وهو إجراء مرتبط بالإشارات السمعية والبصرية.

أثناء التكييف المتكرر ، تنتقل الإشارات السمعية عبر MGN وتحفز تنظيم مستقبلات الناقل العصبي في نقاط الاشتباك العصبي ، مما يعزز الوصلات المتشابكة.

يعبر الجرذ المنقول فيروسيا: عن القنوات الأيونية الحساسة للضوء في الخلايا العصبية MGN.

توصيل نبضات منخفضة التردد عبر الألياف الضوئية لفتح هذه القنوات ، وهي عملية تسمى التحفيز البصري الوراثي.

يؤدي تدفق الكاتيون الناتج إلى إطلاق ناقل عصبي منخفض التردد.

ترتبط الناقلات العصبية بالمستقبلات الموجودة على الخلايا العصبية في لوس أنجلوس وتحفز تدفق الكالسيوم منخفض المستوى ، مما يحفز استيعاب مستقبلات الناقل العصبي ويضعف نقاط الاشتباك العصبي.

يؤدي ضعف انتقال MGN-LA المشبكي إلى تناقص الاتصال العصبي ، المعروف باسم الاكتئاب طويل الأمد (LTD) ، ويقلل من سلوك البحث عن المخدرات المرتبط بالإشارة.

للحث البصري الوراثي للاكتئاب طويل الأمد أو LTD ، قم بتوصيل كبلات التصحيح بصمام ثنائي ليزر أزرق 473 نانومتر عبر مفصل دوار معلق فوق قفص مبيت قوارض قياسي نظيف. قم بتشغيل الليزر وفقا لتعليمات التشغيل وقم بتوصيل الليزر بمولد النبض. اضبط الإعدادات لإعطاء الجرذ 900 نبضة من الضوء عند 2 ميكروثانية عند 1 هرتز. قم بقياس ناتج الضوء من خلال سلك التصحيح باستخدام مستشعر الضوء ، واضبط شدة الليزر بحيث يكون ناتج الضوء عبر كابل التصحيح حوالي 5 إلى 7 ميجاوات.

ضع الجرذ في قفص السكن النظيف وقم بإزالة أغطية الغبار وأكمام الطويق ، مما أدى إلى تعريض الحلقات ثم قم بتوصيل أسلاك التصحيح بشكل ثنائي بكل طويق. إذا تم إعدادها بشكل صحيح ، فستتمكن القوارض من التحرك بحرية حول القفص أثناء التحفيز البصري الوراثي. بعد السماح للفأر باستكشاف البيئة لمدة ثلاث دقائق ، قم بتشغيل مولد النبض لبدء التحفيز البصري الوراثي. بعد تحريض الاكتئاب على المدى الطويل ، اسمح للفئران بالبقاء في القفص لمدة ثلاث دقائق قبل إعادته إلى قفص المنزل.