تقييم التأثيرات الوقائية العصبية لمركب الاختبار في نموذج فأر انسداد الشريان الدماغي الأوسط

ابدأ بالفئران المخدرة مع خيوط جراحية على الشريان السباتي الخارجي ، أو ECA ، والشريان السباتي الداخلي ، أو ICA ، والخيوط الرفيعة التي تسد الشريان الدماغي الأوسط ، أو MCA.

ضع مسبار دوبلر ليزر لقياس تدفق الدم الدماغي النسبي في MCA. يؤكد انخفاض تدفق الدم انسداد MCA.

قم بتأمين الفتيل في ICA للحفاظ على انسداد MCA.

يحد هذا الانسداد من تدفق الدم المؤكسج إلى الدماغ ، مما يؤدي إلى موت الخلايا العصبية وتكوين الأنسجة الميتة أو احتشاظ.

بعد فترة الانسداد ، اسحب الفتيل لاستعادة تدفق الدم.

خياطة الشق والسماح للفئران بالتعافي.

قسم الفئران إلى مجموعتين وقم بإعطاء مركب اختبار عن طريق التزقيم الفموي للمجموعة المعالجة ، بينما تظل المجموعة الضابطة غير معالجة.

يدخل المركب إلى الدورة الدموية ، ويصل إلى الدماغ ، ويحد من موت الخلايا المبرمج العصبي ، ويمنع المزيد من الموت العصبي مقارنة بالمجموعة الضابطة غير المعالجة.

يؤكد

احتشاء أصغر في المجموعة المعالجة مقارنة بالمجموعة الضابطة تأثير الحماية العصبية للمركب.

لإعداد نموذج انسداد الشريان الدماغي الأوسط للفأر ، أو MCAO ، تأكد من عدم الاستجابة لتحفيز الحكاية في فأر مخدر يبلغ من العمر ستة أسابيع ، من 22 إلى 25 جراما من الذكور C57 الأسود 6. وضع الماوس على بطانية تحمل درجة حرارة الجسم 36.5 درجة مئوية متصلة بمقياس حرارة.

بعد إزالة كل الشعر من صدر وعنق الفأر عن طريق الحلاقة وكريم إزالة الشعر ، ضع الماوس تحت مجهر ستيريو وقم بعمل شق جلدي بطول سنتيمترين في وسط الرقبة. اعزل بعناية الشريان السباتي المشترك الأيسر والشريان السباتي الخارجي وفرع الشريان السباتي الداخلي عن الأنسجة الضامة المحيطة. واستخدم خياطة حريرية 4-0 لربط الشريان السباتي الخارجي والشريان السباتي المشترك ، مع عقدة نصف وصلة ربط لمنع تدفق الدم مؤقتا إلى الشريان السباتي الداخلي.

أدخل سمكها من 0.1 إلى 0.12 ملم ، وطولها 11 ملم ، مطلية بالسيليكون ، 8-0 خيوط أحادية ، 4-0 خياطة حريرية صفرية عبر الشريان السباتي الداخلي إلى أصل الشريان الدماغي الأوسط الأيسر. واستخدم مقياس تدفق دوبلر بالليزر لقياس الانخفاض في تدفق الدم الدماغي النسبي. ثبت الفتيل الذي تم إدخاله في الأوعية الدموية لمدة ساعتين ، بينما يكون الشريان الدماغي مسدودا.

في نهاية فترة الانسداد ، اسحب الفتيل بعناية لاستعادة تدفق الدم لمدة 22 ساعة من إعادة التروية. واستخدم 3-0 خيوط حريرية لخياطة الجلد في خمسة أماكن بعقدتين نصفيتين. ثم أعد الفأر إلى قفصه للتعافي من التخدير. بعد ساعة واحدة من نهاية إعادة التروية ، قم بإعطاء 300 ملليغرام لكل كيلوغرام من وزن الجسم G-Rex لحيوانات التجارب فقط عن طريق التزقيم عن طريق الفم.