في المختبر، والسد النسخ من مرنا luciferase المراسل Gaussia تلاه ترنسفكأيشن الخلية هيلا

18.4K مشاهدة

استشهد بها 13

08:55 دقيقة

مارس 26, 2012

10.3791/3702-v

مارس 26, 2012

18.4K مشاهدة
 , 

تصف هذه الطريقة عملية تخليق in vitro عالية المردود لكل من mRNA المزود بقبعة (capped) وغير المزود بقبعة (uncapped) من بلازميد خطي يحتوي على جين لوسيفيريز Gaussia (GLuc). يتم تنقية الـ RNA، ثم تُضاف القبعة إنزيميًا إلى جزء من الـ RNA غير المزود بقبعة باستخدام إنزيم إضافة القبعة الخاص بفيروس Vaccinia. وفي الخطوة النهائية، يتم ترانسفكشن الـ mRNA في خلايا HeLa، ثم تُفحص السوائل الطافية للمزارع الخلوية لقياس نشاط اللوسيفيريز.

استكشف المزيد من الفيديوهات

تغطية الحمض النووي الريبوزي (RNA Capping)

Chapters in this video

0:05

العنوان

1:33

النسخ في المختبر باستخدام طقم T7 High-yield RNA Synthesis Kit

3:29

تغطية الحمض النووي الريبي باستخدام نظام Vaccinia Capping System

4:17

ترنسفكشن خلايا HeLa باستخدام طقم TransIT mRNA Transfection Kit

6:08

مقايسات لوسيفيريز Gaussia (GLuc) ولوسيفيريز Cypridina (CLuc)

7:20

النتائج التمثيلية

8:36

الخلاصة

Related Videos