في المختبر، والسد النسخ من مرنا luciferase المراسل Gaussia تلاه ترنسفكأيشن الخلية هيلا
مارس 26, 2012
18.3K مشاهدة
تصف هذه الطريقة عملية تخليق in vitro عالية المردود لكل من mRNA المزود بقبعة (capped) وغير المزود بقبعة (uncapped) من بلازميد خطي يحتوي على جين لوسيفيريز Gaussia (GLuc). يتم تنقية الـ RNA، ثم تُضاف القبعة إنزيميًا إلى جزء من الـ RNA غير المزود بقبعة باستخدام إنزيم إضافة القبعة الخاص بفيروس Vaccinia. وفي الخطوة النهائية، يتم ترانسفكشن الـ mRNA في خلايا HeLa، ثم تُفحص السوائل الطافية للمزارع الخلوية لقياس نشاط اللوسيفيريز.